廣西壯瑤藥驗(yàn)方“抗毒升白合劑”藥效學(xué)研究及抗腫瘤機(jī)制初步探討.pdf

1、目的：對(duì)壯瑤藥驗(yàn)方抗毒升白合劑（KDSB）的急性毒性、體內(nèi)體外抗腫瘤活性、提高機(jī)體免疫活性進(jìn)行研究，并對(duì)其抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行初步的探討。
　　方法：急性毒性試驗(yàn)中，采用一日最大劑量法，觀察給藥后小鼠的體重、食量、四肢活動(dòng)、排泄情況、毛發(fā)及有無(wú)死亡等情況，并制作肝臟病理切片，觀察對(duì)小鼠肝臟的影響。體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)中，用MTT法測(cè)定KDSB對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL7404和人肝癌細(xì)胞HepG-2的抑制作用。體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)中，采用腋下接種S180肉

2、瘤細(xì)胞小鼠模型，灌胃給藥KDSB，計(jì)算腫瘤抑制率、臟器指數(shù)，制作腫瘤、肝臟及脾臟切片；腹腔接種H22腹水瘤細(xì)胞小鼠模型，灌胃給藥KDSB，計(jì)錄小鼠腹圍,計(jì)算生命延長(zhǎng)率。提高免疫力試驗(yàn)中，采用腹腔注射環(huán)磷酰胺制作白細(xì)胞降低小鼠模型，灌胃給與KDSB，7d后眼球取血計(jì)算白細(xì)胞數(shù)，并剝離股骨，計(jì)算骨髓有核細(xì)胞數(shù)?？鼓[瘤機(jī)制研究實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)用Elisa方法測(cè)定荷瘤小鼠血清中IL-2、Bcl-2及p53的含量，分析KDSB的抗腫瘤機(jī)制。
　　

3、結(jié)果：急性毒性試驗(yàn)中，KDSB急性毒性很小，無(wú)法測(cè)出LD50。一天兩次灌胃給予小鼠KDSB濃縮液后，給藥組與對(duì)照組小鼠精神狀態(tài)正常，無(wú)死亡。KDSB對(duì)人肝癌BEL7404及HepG-2細(xì)胞均表現(xiàn)出一定的抑制作用，與空白組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨著藥物濃度的增加，其抑制率越來(lái)越高，存在劑量依賴性。在對(duì)小鼠S180肉瘤抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果各劑量對(duì)小鼠的抑瘤率分別為49.03％、44.78%和32.78%，與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在對(duì)小鼠H2

4、2肝癌抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)中，各劑量對(duì)小鼠肝癌的生命延長(zhǎng)率分別為111.66%，87.00%及73.09%，與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)給藥組免疫器官(脾臟、胸腺)指數(shù)與空白組相比無(wú)變化；均遠(yuǎn)高于環(huán)磷酰胺組，說(shuō)明KDSB能顯著抵抗環(huán)磷酰胺引起的免疫功能抑制。腫瘤病理切片顯示各組藥物能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，肝臟脾臟切片未見明顯病理變化。KDSB對(duì)治療量CTX化療引起的荷瘤小鼠體重、骨髓有核細(xì)胞數(shù)和外周血白細(xì)胞數(shù)下降有明顯的對(duì)抗作用。機(jī)制研究中

5、發(fā)現(xiàn)KDSB能降低荷瘤小鼠血清Bcl-2含量，升高小鼠血清IL-2及p53含量。
　　結(jié)論：急性毒性實(shí)驗(yàn)證明該制劑屬于較安全的制劑。KDSB對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL7404、HepG-2都表現(xiàn)出了抑制作用，并且在實(shí)驗(yàn)的研究濃度范圍內(nèi)，對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制作用與樣品的濃度存在劑量依賴的關(guān)系，即隨著濃度的增大其抑制率也隨之上升。KDSB各劑量組能有效抑制小鼠S180肉瘤生長(zhǎng)，延長(zhǎng)H22腹水瘤小鼠的存活時(shí)間，具有一定的抗腫瘤作用。KDSB具有明顯的