內(nèi)皮抑素抑制肺癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 建立裸鼠肺癌胸腔移植模型,觀察內(nèi)皮抑素(Endostatin,ES)對(duì)裸鼠肺癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的抑制作用。然后觀察重組人血管內(nèi)皮抑素(YH-16)聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱(NVB)+順鉑(DDP)(NP方案)治療晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的療效和安全性,并與NP方案比較。
　　 方法：
　　 將H460大細(xì)胞肺癌接種于裸鼠左側(cè)胸腔,將接種后的20只裸鼠隨機(jī)分成兩組,內(nèi)皮抑素組(ESG)和對(duì)照組(CG)各10只。接

2、種腫瘤的當(dāng)天即開(kāi)始以20mg/kg/日的劑量對(duì)ESG裸鼠進(jìn)行皮下注射,持續(xù)20天,CG動(dòng)物以同樣的劑量注射滅菌PBS。每日稱量動(dòng)物體重,觀察裸鼠生存狀況,記錄動(dòng)物生存時(shí)間,計(jì)算動(dòng)物生存率。肺癌細(xì)胞種植后第21天通過(guò)摘取眼球處死動(dòng)物,收集血液,離心,收集血清,分裝,于-20度冰箱保存待用。同時(shí)解剖裸鼠觀察肺、肝、心、腎、腦及其他臟器轉(zhuǎn)移情況,并剝?nèi)⌒厍粌?nèi)腫瘤組織稱重,用明膠酶譜法測(cè)定動(dòng)物外周血中基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metall

3、oproteinase-2,MMP-2)的表達(dá)情況。對(duì)第21天前死亡的裸鼠直接解剖并剝?nèi)⌒厍粌?nèi)腫瘤組織稱重。
　　 入組晚期NSCLC病例30例,給予NP+YH-16方案化療2個(gè)周期,14天為1周期。并以同期18例有相同特征并行NP方案治療的患者作對(duì)照。觀察兩組的有效率、腫瘤進(jìn)展時(shí)間(TIP)、生活質(zhì)量和不良反應(yīng)。采用明膠酶譜法檢測(cè)患者血中MMP-2的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 裸鼠肺癌胸腔內(nèi)接種成瘤率100％,

4、并形成胸膜、肺、肝轉(zhuǎn)移。移植瘤生長(zhǎng)情況:觀察可見(jiàn),注射PBS的CG小鼠狀態(tài)差,消瘦,呈惡液質(zhì)狀態(tài),而注射內(nèi)皮抑素治療的ESG小鼠狀態(tài)較好,體重?zé)o明顯減輕。隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng),CG動(dòng)物體重下降明顯,CG裸鼠第1天和第21天體重差值(1.940±2.896)g和ESG(-0.8204±2.829g)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t=-2.156,P=0.045<0.05。CG移植瘤重量(1.545±0.1464)g明顯大于ESG(0.9404±0

5、.359)g,t=-3.163,p=0.005<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 裸鼠生存期:CG于用藥后第15、18、19、20d共有4只裸鼠死亡,ESG于用藥后第20d有1只裸鼠死亡,CG裸鼠死亡時(shí)間均較ESG早。
　　 明膠酶譜電泳:MMP-2的相對(duì)分子量為72kDa,ESG和CG動(dòng)物血液中MMP-2表達(dá)強(qiáng)度及蛋白量結(jié)果提示ESG動(dòng)物血液中基質(zhì)金屬蛋白酶2的表達(dá)明顯低于CG。
　　 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組有效率分

6、別為51.9％、16.7％(x2=5.688,P=-0.017)；實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組受益率分別為85.1％、72.2％(x2=0.469,P=0.494)。實(shí)驗(yàn)組中位TTP較單用NP組更長(zhǎng)(分別為5.40月和3.15月)。主要毒副反應(yīng)為血液學(xué)毒性和惡心嘔吐等,兩組間毒副反應(yīng)發(fā)生率無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　 明膠酶譜電泳結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組患者治療后血中MMP-2的表達(dá)均低于治療前,并低于對(duì)照組患者血中MMP-2的表達(dá)。