TNFα308G-A基因多態(tài)性與食管鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后關(guān)系的研究.pdf

1、目的:食管癌是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。在我國(guó)食管癌發(fā)病率高、預(yù)后不佳,五年生存率僅35％左右。影響食管癌預(yù)后的因素很多,除了腫瘤分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等,機(jī)體的免疫狀態(tài)、遺傳易感性日益受到重視。
　　 腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)是一種具有多種生物活性的致炎細(xì)胞因子,由激活的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。該基因啟動(dòng)子區(qū)域轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游第308

2、位點(diǎn)存在G/A等位基因多態(tài)性,研究表明,TNFα308G/A基因多態(tài)性可以通過(guò)影響TNFα轉(zhuǎn)錄水平使血清TNFα高表達(dá)從而增加多種腫瘤的易感性,并導(dǎo)致患者預(yù)后不良。有關(guān)TNFα308G/A多態(tài)性與食管癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道,但結(jié)論不一,而該基因多態(tài)性位點(diǎn)與食管癌預(yù)后是否相關(guān)也尚無(wú)定論,我們針對(duì)中國(guó)人群的遺傳背景,研究河北漢族人群TNFα308G/A基因多態(tài)性分布情況,探討其與食管鱗狀細(xì)胞癌(esophageal squamous

3、 cell carcinoma,ESCC)臨床病理指標(biāo)及預(yù)后的相關(guān)性,為食管癌的防治和預(yù)后評(píng)價(jià)提供遺傳學(xué)理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1材料:ESCC120例,選自河北醫(yī)科大學(xué)第四臨床病理科2004年1月～2005年12月間住院手術(shù)切除的原發(fā)性食管癌福爾馬林固定石蠟包埋組織,所有病例經(jīng)病理證實(shí)為鱗狀細(xì)胞癌,術(shù)前均未接受過(guò)任何治療,并有完整的臨床隨訪資料。對(duì)照組95例選自同一時(shí)期電子內(nèi)鏡室咬檢的非癌癥病人的食管福爾馬林固

4、定石蠟包埋組織。
　　 2福爾馬林固定石蠟包埋組織DNA的提取采用傳統(tǒng)二甲苯脫蠟,蛋白酶K消化-酚氯仿抽提法提取基因組DNA。
　　 3 PCR-SSP分析:應(yīng)用等位基因特異性聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-SSP)技術(shù)擴(kuò)增目的基因,檢測(cè)食管癌組和對(duì)照組的TNFα308G/A基因多態(tài)性的基因型分布及等位基因頻率分布情況。x2檢驗(yàn)及Fisher's確切概率法比較兩組分布頻率的差別,并確定其相對(duì)危險(xiǎn)度OR值及OR95％CI；COX回歸

5、模型對(duì)有隨訪資料的120例ESCC患者進(jìn)行多因素生存分析；Kaplan-Meier生存曲線進(jìn)行單因素生存分析,Log-Rank法比較G、A基因型攜帶者5年生存期的差別。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1 ESCC患者組與非癌癥對(duì)照組TNFα308G/A基因型和等位基因頻率的分布經(jīng)Hardy-Weinberg平衡分析,具有群體代表性。TNFα308GG、GA、AA基因型在ESCC患者

6、組分布頻率分別為82.5％、15.83％、1.67％；在非癌癥對(duì)照組,則分別為86.32％、12.63％、1.05％。ESCC患者組與對(duì)照組相比基因型分布頻率無(wú)顯著差異(x2=0.58,P=0.446)?；蛐皖l率的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)分析發(fā)現(xiàn),AA+GA基因型ESCC患者的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是GG基因型的1.338倍,95％CI=0.631～2.836,結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 ESCC患者組G、A等位基因頻率分別為90.42％和9.58％,對(duì)照組

7、分別為92.63％和7.37％,兩組比較差異無(wú)顯著性。與G等位基因相比,A等位基因增大食管癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.332,95％CI=0.667～2.667),但差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2 TNFα308G/A基因型與ESCC患者臨床病理特征的關(guān)系比較顯示,GA+AA基因型在高～中分化組中的比例為14.29％(15/105)；在低分化組比例為40.00％(6/15),GA+AA基因型在低分化個(gè)體中所占比例高于高中分化組,兩

8、組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。GA+AA等位基因型臨床分期較晚(Ⅲ期+Ⅳ期)的患者中分布比例明顯高于臨床分期早(0～Ⅰ期+Ⅱ期)的患者,分別為10.84％(9/83)和32.43％(12/37),二者相比具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性(P<0.05)。不同基因型與患者年齡、性別、腫瘤部位、浸潤(rùn)深度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)未見(jiàn)明顯相關(guān)性P均>0.05。
　　 3 Kaplan-Meier法單因素生存分析結(jié)果表明,腫瘤組織分化

9、、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期和TNFα308G/A基因型是影響ESCC預(yù)后的相關(guān)因素(P<0.01)。而患者的性別、年齡與預(yù)后無(wú)關(guān)(P>0.05)。A等位基因攜帶者與G等位基因攜帶者相比,5年生存率明顯低(P=0.000<0.05),有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4 COX模型多因素分析性別、年齡、浸潤(rùn)深度、組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNFα308基因型與ESCC患者預(yù)后的關(guān)系,結(jié)果表明腫瘤的組織分化、浸潤(rùn)深度、臨床分

10、期、TNFα308基因型對(duì)預(yù)后有顯著影響(P<0.05)。這一結(jié)果與Kaplan-Meier單因素生存分析結(jié)果基本一致。
　　 結(jié)論:
　　 1在研究所涉及的人群中,TNFα308G/A基因多態(tài)性的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。TNFα308G/A基因多態(tài)性基因型在河北地區(qū)漢族人群中的分布基本一致,TNFα308G/A基因多態(tài)性可能與ESCC的發(fā)生無(wú)關(guān)聯(lián)。
　　 2 TNFα308G/A GA+A