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1、ExplorationofthemolecularmecIIanlSmS10raDDlel●n1(MalusdomesticaBorkh)columnartreearChitectureThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomy1一一BaiMudan(Derpartmen
2、tofHorticulture)Supervisor:WangCaihongQingdaoChmaJune,2013碩士學位論文摘要蘋果柱型性狀形成的分子機制探討摘要蘋果是世界最重要的水果之一,其栽培面積和產量在我國居于前列。進入2l世紀后,蘋果的發(fā)展趨于集約化、機械化和現(xiàn)代化,而蘋果的矮化密植栽培正是體現(xiàn)集約化栽培和適合機械化作業(yè)的一種現(xiàn)代栽培方式。蘋果的矮化密植具有早果豐產、易于管理和適于機械化作業(yè)等優(yōu)點。柱型蘋果是一種特殊的矮生突
3、變類型,非常適合于矮化密植栽培。但目前柱型性狀產生的分子機制還不清楚。研究柱型基因的分子標記,不僅在柱型性狀的輔助選擇方面具有重要價值,同時也對最終克隆該基因具有重要意義。赤霉素(Gibberellins,GAs)是一種重要的植物激素,具有生物活性的GAs作用于高等植物的整個生命周期。其中,對植株高矮的控制,是赤霉素最令人矚目的生理作用之一。研究表明,植株高矮與體內的GAs類型及其合成代謝途徑密切相關。目前,在蘋果上,影響赤霉素合成的幾
4、個步驟的關鍵酶基因還不清楚,因此,克隆這些基因,對揭示其分子特征并了解其對重要性狀形成的影響具有重要意義。本研究的主要內容及獲得的主要結果如下:1本研究以‘富士’‘舞姿’的F1群體為試材,用高通量熔解曲線(HRM)方法檢測到一個與蘋果柱型性狀緊密連鎖的SSR標記(Hi01b01)。對HRM反應體系的分析評價表明:采用5”L反應體積可以獲得與10L或20吐反應體積相同的檢測效果;在5此反應體積中,DNA濃度小到O25ng/ptL時,PCR
5、擴增及隨后的HRM分析效果依然良好;采用降落PCR擴增模式也能取得良好的HRM多態(tài)性檢測結果。2從‘富士’蘋果莖尖中克隆到3個新的赤霉素合成過程中的關鍵酶基因MdCPS、MdKS和MdKA0,它們的GeneBank登錄號分別為:KC4339421、JQ2815211和KC4339411,編碼序列長度分別為2400、2214和1512bp且編碼的氨基酸殘基數分別為799、737和503aa;另外,通過與蘋果基因組的比對分析,將影響蘋果赤霉
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