內(nèi)毒素耐受小鼠IFN-γ、IL-10的表達(dá)以及骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞功能的初步研究.pdf

1、感染性疾病是危脅人類健康的主要疾病之一，革蘭陰性桿菌是臨床常見(jiàn)的致病菌。內(nèi)毒素(endotoxin)/脂多糖(LPS)是革蘭陰性桿菌細(xì)胞壁的重要結(jié)構(gòu)成分和致病因子，革蘭陰性桿菌感染時(shí)，可出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥，嚴(yán)重時(shí)可并發(fā)急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)、多器官功能衰竭(MOF)，死亡率很高。目前無(wú)針對(duì)內(nèi)毒素的特效治療。內(nèi)毒素耐受指接受小劑量?jī)?nèi)毒素刺激后形成的對(duì)大劑量?jī)?nèi)毒素呈低反應(yīng)或無(wú)反應(yīng)的現(xiàn)象，其特征是單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)促炎癥細(xì)胞因子能力下降。

2、 本實(shí)驗(yàn)采用連續(xù)小劑量腹腔注射內(nèi)毒素的方法建立內(nèi)毒素耐受小鼠模型，用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)注射大劑量?jī)?nèi)毒素前和注射后6小時(shí)血清和肺組織中的IL-10的水平以評(píng)價(jià)內(nèi)毒素耐受時(shí)抑炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生情況；從小鼠骨髓分離、培養(yǎng)DCs，檢測(cè)內(nèi)毒素耐受小鼠骨髓DCs對(duì)病原體成分葡聚糖的吞噬功能；檢測(cè)內(nèi)毒素耐受小鼠骨髓DCs表面協(xié)同刺激分子的表達(dá)，間接評(píng)價(jià)DCs的抗原呈遞功能；采用ELISA檢測(cè)內(nèi)毒素耐受小鼠骨髓DCs培養(yǎng)液

3、上清中IL-12的水平，和正常小鼠骨髓DCs對(duì)比分析，從而進(jìn)一步明確內(nèi)毒素耐受現(xiàn)象的本質(zhì)，為其應(yīng)用于臨床防治感染性疾病提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 結(jié)論：(1)小劑量(1mg/kg/d)LPS連續(xù)腹腔注射4天能夠在C57BL/10J正常小鼠中建立內(nèi)毒素耐受小鼠模型。(2)內(nèi)毒素耐受小鼠注射大劑量LPS后TNF-α、IFN-γ等促炎癥細(xì)胞因子表達(dá)受抑制，而主要的抑炎癥細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)未受明顯影響，IFN-γ/IL-10平衡存在向IL-