人胚胎視網(wǎng)膜干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化.pdf_第1頁
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1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文人胚胎視網(wǎng)膜干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化姓名：胡蓉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)（視網(wǎng)膜?。┲笇?dǎo)教師：高玲20050501ABSTRACTPurposes1Toestablishaculturesystemofhumanfetalretinalstemcells(RSCs)invitro2Toinvestigatetheroleofretinoicacid(RAlintheinduceddifferentiationo

2、fRSCsinvitroMethods1Retinalstemcellswereisolated丹omhumanfetalneuralretinaeatthe8th12thweekofgestationandculturedrespectivelyinuncoateddishesordishesprecoatedwithpoly—L—ornithineandlaminin(PO／LM)Morphologicalobservationan

3、dimmunohistochemicalanalysiswereapplied2RSCswereculturedinthreedifferentgroups1％fetalbovineserum(controlgroup)，5％fetalbovineserum(5％FBSgroup)and500nMRAplusI％FBS(RAgroup)toinduceRSCstodifferentiateThepositive—expressingce

4、llsandnegetivecellswereidentifiedandcalculatedbymorphologicalandimmunocytochemicalanalysiswithspecificantibodiesagainstNestin，GFAP13Tubulin，RecoverinandRhodopsinnledifferencesoftheratioofpositive—expressingcellsagainstea

5、chantigenwereanalyzedbetweendifferentgroupsResults1TheisolatedcellsformedneurospheresinuncoateddishesandexpressedtheneuroectodermalmarkerNestinbutfailedinpassageⅥ，llilethecellswerecapableofexpressingNestinaswellasdividin

6、gformultiplegenerationsintheprecoateddishes2DifferentiatedRSCsinthethreegroupsexpressedGFAPB—TubulinandRecoverinRSCsdifferentiatedinl％FBS500nMRAmediummaynotonlyexpressthoseabovemarkers，butalshodopsin，withthehighestpositi

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