MEBT-MEBO治療慢性難愈合創(chuàng)面的超微病理及分子水平機(jī)制研究.pdf

1、目的:用熒光定量PCR及超微病理技術(shù)觀察MEBT/MEBO對(duì)大鼠慢性難愈合創(chuàng)面的干預(yù)作用,研究其促進(jìn)潰瘍創(chuàng)面愈合的機(jī)制。
　　方法:將80只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組、模型組、濕潤燒傷膏組、康復(fù)新液組,每組20只。大鼠常規(guī)飼養(yǎng)1周后,各組建立全層皮膚缺損開放性創(chuàng)面模型?？瞻讓?duì)照組建立開放性創(chuàng)面模型后不做處理,按常規(guī)飼養(yǎng)。其余三組在開放性創(chuàng)面模型的基礎(chǔ)上肌注醋酸氫化可的松,制成難愈性創(chuàng)面模型。模型組按創(chuàng)面大小外敷單層生理鹽

2、水紗布;濕潤燒傷膏組以藥膏直接涂布于創(chuàng)面上;康復(fù)新液組創(chuàng)面外噴外敷康復(fù)新液,此三組均在上藥后的創(chuàng)面上加蓋兩層消毒干紗布,用膠布“豐”字形固定,每日定時(shí)換藥2次,連續(xù)12天。在用藥后第12天,觀察各組大鼠創(chuàng)面愈合程度情況,用圖像分析軟件分析計(jì)算出各組創(chuàng)面愈合率。在用藥后第3、6、12天,將所有大鼠在麻醉情況下,取相同部位,切取大小為1mm×1mm×1mm的創(chuàng)面組織制作成超微病理切片觀察大鼠皮膚創(chuàng)面細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu)。在用藥后第12天,

3、將所有大鼠在麻醉情況下,取相同部位的皮膚組織,使用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)MAPKK、c-myc mRNA進(jìn)行相對(duì)定量分析,測(cè)定其表達(dá)量。
　　結(jié)果:(1)用藥第12天創(chuàng)面愈合率比較:空白對(duì)照組平均愈合率為96.75±3.12％;模型組平均愈合率為74.39±2.23％;濕潤燒傷膏組平均愈合率為85.41±1.16％;康復(fù)新液組平均愈合率為81.38±2.42％。濕潤燒傷膏組與模型組相比:F=241.246,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義;濕潤燒傷膏組與康復(fù)新液組相比F=0.283,P>0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)細(xì)胞超微病理結(jié)構(gòu)的比較:用藥第3天,模型組、濕潤燒傷膏組、康復(fù)新液組三組創(chuàng)面均有不同程度的改變,但主要體現(xiàn)在細(xì)胞核形態(tài)改變,明顯發(fā)育異常。用藥第6天,模型組細(xì)胞核依舊破壞嚴(yán)重,線粒體異常;濕潤燒傷膏組與康復(fù)新液組的顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu)有明顯的改善,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體等形態(tài)結(jié)構(gòu)完整,但康復(fù)新液組部分細(xì)胞仍有異常情況存在。用藥第12天,模型組細(xì)胞核仍不完整

5、,但可觀察到少量線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng);濕潤燒傷膏組的細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)育良好,基本恢復(fù)至正常水平;康復(fù)新液組細(xì)胞結(jié)構(gòu)恢復(fù)亦良好,但恢復(fù)程度不及濕潤燒傷膏組。(3)與模型組相比,濕潤燒傷膏組MAPKK mRNA表達(dá)量增高,F=177.410,P<0.05;c-myc mRNA表達(dá)量增高,F=208.163,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與康復(fù)新液組相比,濕潤燒傷膏組MAPKK mRNA表達(dá)量的F=0.148,P>0.05,c-myc mRNA表達(dá)量的