新生豬缺氧缺血性腦病早期DWI影像和HSP70表達的實驗研究.pdf

1、目的：建立穩(wěn)定可靠的新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)的影像動物模型,探討HIE早期MR彌散加權像(DWI)及表觀彌散系數(shù)(ADC)圖影像特點、感興趣區(qū)(ROI)中心區(qū)與周邊區(qū)ADC值和HSP70表達的動態(tài)演變規(guī)律,以及周邊區(qū)ADC值與熱休克蛋白(HSP)70表達之間的相關性,以期為HIE的早期診斷、治療和預后評估提供有價值的臨床參考信息。
　　方法：將58只3日齡新生豬隨機分為:1.模型I組:正常對照組(n=3只)、假手術組(n=3

2、只)、缺氧缺血后3小時組、6小時組、24小時組(各組n=4),缺氧缺血組動物采用單側頸總動脈結扎,混合氣體(8％氧氣和92%氮氣)吸入120分鐘。2.模型II組:正常對照組(n=5只)、假手術組(n=5只)、缺氧缺血后3小時組、6小時組、24小時組(各組 n=10)。缺氧缺血組動物均采用雙側頸總動脈結扎,混合氣體(3%氧氣和97%氮氣)吸入30分鐘。采用1.5T磁共振儀,用EPI-DWI和SE-T2WI序列分別于不同時間點作DWI和T2

3、WI檢查;應用Adventage Workstation AW4.0_05 FuncTool軟件處理生成ADC圖,分別測量各組ROI中心區(qū)和周邊區(qū)的ADC值,并進行不同區(qū)域之間ADC值比較分析。應用SP免疫組化法,檢測HSP70陽性細胞計數(shù),分析不同缺氧缺血組ROI中心區(qū)和周邊區(qū)HSP70表達之間的關系;采用Pearson相關分析分析周邊區(qū)ADC值與HSP70之間的相關性。
　　結果：①HIE模型的建立:模型I組缺氧缺血動物未出現(xiàn)

4、缺氧缺血和神經(jīng)損害的癥狀與體征,常規(guī)病理切片無神經(jīng)細胞變性及壞死的改變。模型 II組缺氧缺血組動物缺氧時出現(xiàn)了煩躁不安尖叫,四肢抽搐、肌張力增高、豎尾、角弓反張等神經(jīng)系統(tǒng)體征,常規(guī)病理切片有神經(jīng)細胞腫脹,皺縮,紅色樣變性;尼氏體空泡樣變、凝集、溶解;核深染。②HIE早期MRI影像變化特點:模型I組正常對照組和假手術組及各缺氧缺血組均無異常信號出現(xiàn)。模型II組正常對照組和假手術組DWI無異常信號,缺氧缺血3小時組DWI上呈高信號,隨缺氧缺

5、血后時間的延長高信號灶范圍擴大而呈彌漫性改變;ADC圖上出現(xiàn)了與DWI對應的低信號,病變的不均勻性更明顯。感興趣區(qū)中心區(qū)和周邊區(qū)ADC值的測量表明:中心區(qū)ADC值呈明顯下降趨勢,各組間ADC值均有顯著性差異(P<0.01);周邊區(qū)ADC值缺氧缺血后3小時至6小時下降緩慢,二者之間無差異性(P>0.05),6小時后下降迅速,與24小時ADC值比較有顯著性差異(P<0.01);各組中心區(qū)和周邊區(qū)ADC值比較均有顯著性差異(P<0.01)。③

6、HIE早期HSP70陽性表達的特點:模型I組均無HSP70陽性細胞表達。模型II組于3小時出現(xiàn)HSP70陽性細胞,6小時達高峰,之后呈進行性下降。各組中心區(qū)HSP70陽性細胞計數(shù)3小時與6小時組有差異(P<0.05),6小時與24小時組有顯著性差異(P<0.01);各組周邊區(qū)HSP70陽性細胞計數(shù)均呈顯著性差異(P<0.01);各中心區(qū)和周邊區(qū)HSP70表達有顯著性差異(P<0.01)。④各時間段周邊區(qū)ADC值與HSP70表達的相關性:

7、缺氧缺血后3小時至6小時病灶周邊區(qū) HSP70陽性細胞計數(shù)與 ADC值無相關性;6小時至24小時呈高度正相關(r=0.926,P<0.01)。
　　結論：1.新生豬缺氧缺血型模型的腦部病理改變可以準確地反映新生兒HIE的腦部病理特征,是一個穩(wěn)定可靠、可重復性好的HIE影像研究動物模型。2.T2WI顯示HIE病灶不敏感,DWI可以更加敏感地顯示HIE病灶。3.HSP70的表達顯示,HIE病灶內(nèi)存在半暗帶區(qū)域,其持續(xù)時間不少于6小時。