不同比例多不飽和脂肪酸對(duì)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀(guān)察不同比例多不飽和脂肪酸對(duì)體外培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa的增殖作用影響，初步探討不同比例多不飽和脂肪酸對(duì)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞可能的作用機(jī)制，為多不飽和脂肪酸在臨床中治療人子宮內(nèi)膜癌提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
　　方法：人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa常規(guī)培養(yǎng)于含10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的High-Glose DMEM培養(yǎng)液中，在37℃、5％CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)情

2、況，實(shí)驗(yàn)分對(duì)照組，n-6組，n-6/n-3為10∶1組，n-6/n-3為1∶1組，n-3組。采用MTT法檢測(cè)不同比例多不飽和脂肪酸處理Ishikawa細(xì)胞24h后，對(duì)Ishikawa細(xì)胞增殖的影響;倒置顯微鏡法觀(guān)察各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;RT-PCR和Western blot法測(cè)定不同比例多不飽和脂肪酸處理Ishikawa細(xì)胞24h后Akt、mTOR、VEGF三者的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果顯示不同比例多不飽和脂

3、肪酸處理Ishikawa細(xì)胞24h后，各組細(xì)胞增殖情況各異:單純n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PUFAs能夠明顯促進(jìn)Ishikawa細(xì)胞增殖，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，單純n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3PUFAs則顯著抑制細(xì)胞增殖，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示單純n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PUFAs作用Ishikawa細(xì)胞24h

4、后Akt、mTOR、VEGF的mRNA表達(dá)增加(P＜0.05)，單純n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3PUFAs使Akt、mTOR、VEGF的mRNA表達(dá)下降(P＜0.05); Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示單純n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PUFAs作用Ishikawa細(xì)胞24h后Akt、mTOR、VEGF蛋白表達(dá)增加(P＜0.05)，單純n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3PUFAs使Akt、mTO

5、R、VEGF蛋白表達(dá)下降(P＜0.05)。
　　結(jié)論：不同比例n-6/n-3PUFAs在體外條件下可作用于人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞，隨著n-6PUFAs濃度增加，可促進(jìn)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa增殖，與之相反，n-3 PUFAs濃度增加可促進(jìn)其凋亡;不同比例n-6/n-3PUFAs作用于人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞，可引起Akt、mTOR、VEGF表達(dá)水平變化;不同比例n-6/n-3PUFAs對(duì)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞I