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文檔簡介
1、目的:
探索支架蛋白IQGAP1在卵巢癌腫瘤干細胞的表達,并觀察IQGAP1對卵巢癌腫瘤干細胞分化過程中的侵襲能力的影響。
方法:
以漿液性卵巢癌3AO細胞株為親本細胞,無血清懸浮培養(yǎng)法獲得腫瘤干細胞。采用流式細胞術驗證腫瘤干細胞的標記分子CD24表達,利用細胞免疫熒光實驗觀察干性分子OCT4和SOX2的定位。利用含10%胎牛血清培養(yǎng)基誘導其分化,期間光鏡下觀察細胞形態(tài)變化。
qRT-PCR法和W
2、estern-blot法分別檢測IQGAP1 mRNA和蛋白的表達水平變化。通過劃痕實驗和Transwell小室觀察細胞遷移侵襲能力;采用wst-1法檢測細胞增殖能力。
結果:
1.利用3AO細胞株通過無血清培養(yǎng)法獲得表型CD24(-)表型的腫瘤干細胞。
2.相比3AO細胞株中,IQGAP1在腫瘤干細胞中呈低表達。
3.在3AO細胞株中,沉默IQGAP1后減弱了腫瘤遷移、侵襲能力,而不會改變細胞的
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