人CD4胞外區(qū)及人和小鼠MHCⅡ分子胞外區(qū)的表達(dá)及活性鑒定.pdf

1、CD4分子在機(jī)體免疫系統(tǒng)中起重要作用，它與MHCⅡ、TCR相互作用，形成CD4-MHCⅡ-TCR復(fù)合物，介導(dǎo)特異性抗原呈遞以及激活CD4+T細(xì)胞，引發(fā)機(jī)體特異性的免疫應(yīng)答。同時(shí)，CD4是HIV感染的宿主細(xì)胞上主要受體，CD4融合蛋白的藥物及CD4的抗體在艾滋病的臨床研究中顯示了良好的治療效果。
　　 本研究嘗試通過(guò)真核及原核表達(dá)系統(tǒng)對(duì)人CD4蛋白胞外段進(jìn)行表達(dá)。真核表達(dá)中，應(yīng)用CHO細(xì)胞和293FT細(xì)胞分別表達(dá)CD4蛋白胞外段，

2、僅含有信號(hào)肽的序列有小量表達(dá)。原核表達(dá)中，應(yīng)用大腸桿菌BL21菌表達(dá)的人CD4胞外段不同域以包涵體的形式存在，經(jīng)尿素變性及復(fù)性，再經(jīng)分子篩純化之后，其純度能夠達(dá)到90％以上。經(jīng)HIV-1NL4-3細(xì)胞中和實(shí)驗(yàn)，表明CD4(d1)，CD4(d1-2)，CD4(d1-4)有阻斷HIV-1NL4-3病毒感染TZM-b1細(xì)胞的能力，因此表達(dá)的蛋白是有活性的。因此通過(guò)大腸桿菌這一原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的人CD4蛋白胞外段不同域，可用于進(jìn)一步分析CD4抗