從NF-κB信號通路研究至真方對人大腸癌細胞多藥耐藥的影響及機制.pdf

1、本研究采用“國醫(yī)大師”張鏡人教授經(jīng)驗方--至真方對人大腸癌多藥耐藥細胞進行干預(yù)，觀察至真方含藥血清對該細胞NF-κB活性的影響，并從NF-κB信號通路探討至真方逆轉(zhuǎn)人大腸癌細胞多藥耐藥的作用機制。采用CCK-8法檢測HCT-8/VCR細胞的耐藥性及篩選至真方有效作用濃度；ELISA法檢測不同濃度至真方含藥血清對HCT-8/VCR細胞NF-κB活性的影響；流式細胞術(shù)檢測至真方含藥血清對HCT-8/VCR細胞凋亡率的影響；Western b

2、lot、Real-timePCR檢測至真方含藥血清對HCT-8/VCR細胞NF-κB/p65、IκB-α和Caspase-3基因及蛋白表達的影響。研究表明：⑴人大腸癌耐藥細胞HCT-8/VCR對VCR的耐藥指數(shù)為 73.38，該細胞系對5-FU、CDDP、EP等藥物也產(chǎn)生了交叉耐藥，耐藥指數(shù)分別為 20.52、6.61、4.40，是一個典型的多藥耐藥細胞系。⑵體積分數(shù)大于8％時，高、中、低劑量含藥血清組對HCT-8/VCR細胞的抑制率與

3、空白血清組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.01），且呈濃度遞增趨勢，高、中劑量組比較差異性不顯著（P>0.05）。⑶不同濃度至真方含藥血清作用于HCT-8/VCR細胞12h、24h后，NF-κB活性較HCT-8/VCR陰性對照組明顯降低（P<0.01），在一定范圍內(nèi)呈濃度依賴關(guān)系；16％、32％含藥血清作用HCT-8/VCR細胞12h后，NF-κB活性與BAY11-7082陽性對照組無明顯差異（P>0.05）。⑷流式細胞儀檢測結(jié)果表明，至真