鹽酸阿米洛利對(duì)百草枯中毒致急性肺損傷保護(hù)作用的機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究百草枯誘導(dǎo)急性肺損傷中毒機(jī)制中胞內(nèi)鈣離子的作用，并探討鈉氫交換體-1（NHE-1）、鈉通道阻滯劑鹽酸阿米洛利對(duì)百草枯中毒誘導(dǎo)的急性肺損傷的保護(hù)及治療作用。
　　 方法:體外培養(yǎng)A549細(xì)胞，用不同濃度百草枯進(jìn)行不同時(shí)間的干預(yù)，MTT 法檢測(cè)半數(shù)成活率以篩選半數(shù)死亡時(shí)間和半數(shù)死亡濃度作為實(shí)驗(yàn)干預(yù)點(diǎn)，并以此干預(yù)點(diǎn)構(gòu)建細(xì)胞百草枯中毒模型，根據(jù)不同藥物處理分為3個(gè)實(shí)驗(yàn)組:空白對(duì)照組、百草枯損傷組和鹽酸阿米洛利保護(hù)組。利用實(shí)時(shí)定

2、量PCR技術(shù)分析各實(shí)驗(yàn)組NHE-1mRNA表達(dá)水平變化；用熒光染料Fluo-3/AM 染色，利用激光掃描共聚焦顯微鏡的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)胞內(nèi)鈣離子的優(yōu)勢(shì)，記錄給予百草枯刺激和鹽酸阿米洛利保護(hù)時(shí)的胞內(nèi)游離鈣離子濃度變化。數(shù)據(jù)采用（─X±S）表示，應(yīng)用SPSS16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示NHE-1mRNA表達(dá)水平在藥物對(duì)照組明顯比百草枯組和空白對(duì)照組低（P<0.05）。當(dāng)給予百草枯刺激時(shí)，胞內(nèi)游離鈣離子濃度