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文檔簡介
1、目的:研究百草枯誘導急性肺損傷中毒機制中胞內鈣離子的作用,并探討鈉氫交換體-1(NHE-1)、鈉通道阻滯劑鹽酸阿米洛利對百草枯中毒誘導的急性肺損傷的保護及治療作用。
方法:體外培養(yǎng)A549細胞,用不同濃度百草枯進行不同時間的干預,MTT 法檢測半數(shù)成活率以篩選半數(shù)死亡時間和半數(shù)死亡濃度作為實驗干預點,并以此干預點構建細胞百草枯中毒模型,根據(jù)不同藥物處理分為3個實驗組:空白對照組、百草枯損傷組和鹽酸阿米洛利保護組。利用實時定
2、量PCR技術分析各實驗組NHE-1mRNA表達水平變化;用熒光染料Fluo-3/AM 染色,利用激光掃描共聚焦顯微鏡的實時監(jiān)測胞內鈣離子的優(yōu)勢,記錄給予百草枯刺激和鹽酸阿米洛利保護時的胞內游離鈣離子濃度變化。數(shù)據(jù)采用(─X±S)表示,應用SPSS16.0 軟件進行統(tǒng)計分析。
結果:實時定量PCR結果顯示NHE-1mRNA表達水平在藥物對照組明顯比百草枯組和空白對照組低(P<0.05)。當給予百草枯刺激時,胞內游離鈣離子濃度
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