蟲草菌粉對急性百草枯中毒大鼠肺損傷的治療作用及相關(guān)機制研究.pdf

1、目的：研究分析蟲草菌粉對急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺損傷的治療作用及相關(guān)機制。
　　方法：選用健康成年SD大鼠210只（雌雄各半），隨機分為A、B、C、D組：A組（健康對照組）35只：給予一次2.5ml生理鹽水腹腔注射，每日給予5ml生理鹽水灌胃；B組（單純?nèi)径窘M）35只：給予一次PQ20mg/kg腹腔注射， PQ濃度2mg/ml，每日給予5ml生理鹽水灌胃；C組（蟲草菌粉治療C1、C2、C3組，低、中、高劑量各35只）105只：

2、給予一次PQ20mg/kg腹腔注射，PQ濃度2mg/ml。低、中、高劑量每日給予蟲草菌粉0.3g/kg、1.5g/kg、5g/kg，5ml生理鹽水稀釋后灌胃；D組（維生素 E治療組）35只：給予一次 PQ20mg/kg腹腔注射，PQ濃度2mg/ml。每日給予維生素E10mg/kg，5ml生理鹽水稀釋后灌胃。各組大鼠均于造模后1d、3d、7d、14d、21d、28d、35d進行觀察，觀察其一般狀況，毛色、呼吸、精神狀態(tài)、進食等。染毒組、治

3、療組（低、中、高劑量）、維生素E治療組分別于以上時間節(jié)點各取5只大鼠，心臟取血處死，留取血液標(biāo)本，測定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px），于第7天、第21天取支氣管肺泡灌洗液、血液標(biāo)本送檢T淋巴細胞亞群?？瞻讓φ战M也在相同時間點取5只大鼠測定以上指標(biāo)，同時，以上各組取大鼠左主支氣管及整個左肺，用濾紙吸干血漬，予以支氣管肺泡灌洗（BALF），右肺前葉組織制備病理切片，進行蘇木精-伊紅染色（HE）

4、，在光鏡下進行病理觀察。BALF和外周血中T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）的表達采取熒光直接標(biāo)記法、流式細胞儀檢測。應(yīng)用免疫組化方法檢測PQ中毒肺組織中α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）的表達。α1-AT免疫組化染色陽性切片于40HP物鏡下選取10個視野觀測染色陽性細胞胞漿平均吸光度（OD），其單位面積的相對含量可反應(yīng)染色強度。
　　結(jié)果：1.大鼠一般情況：A組大鼠各時間點精神狀態(tài)、活動度均表現(xiàn)良好，

5、呼吸平穩(wěn)，活潑好動，皮毛光澤發(fā)亮，進食多，難以捕捉；C（中、高劑量）組、D組早期出現(xiàn)精神稍差，活動后稍氣促，重者活動后口唇、肢端、尾端輕度紫紺，經(jīng)治療后一周癥狀緩解，進食增加，好動，精神狀態(tài)正常；C（低劑量）組早期癥狀較中、高劑量組重，毛發(fā)松散，靜息時即出現(xiàn)口唇、肢端、尾端輕度紫紺，進食減少，精神差，治療后癥狀緩解時間較中、高劑量組長。B組染毒后精神狀態(tài)差，毛發(fā)松散，步態(tài)蹣跚，進食減少，匍匐不動，易捕捉，氣促明顯，口唇、肢端、尾端明顯紫

6、紺。
　　2.肺組織損傷情況：C（中、高劑量）組與B組比較病理學(xué)變化明顯，肺組織損傷程度明顯改善，低劑量組較B組有一定改善。D組與A組比較，病理學(xué)變化明顯，肺組織損傷程度明顯改善。
　　3.血清中MDA、SOD、GSH-Px水平：C（低、中、高劑量）組與B組比較，水平均優(yōu)于B組（P＜0.01，P＜0.05）；D組與A組比較，水平均顯著優(yōu)于A組（P＜0.05）。
　　4.外周血中T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8

7、+、CD4+/CD8+）：第1、3周時，C1、C2、C3組靜脈血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+較B組上升（P＜0.01，P＜0.05），蟲草菌粉治療劑量越大，治療時間越長，CD4+/CD8+比值趨于正常。D組靜脈血中CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+均較B組上升（P＜0.01，P＜0.05）。
　　5.BALF中T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）：第1、3周時，C1、C2、

8、C3組BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較B組上升（P＜0.01，P＜0.05），蟲草菌粉治療劑量越大，治療時間越長，CD4+/CD8+比值趨于正常。D組BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較B組上升（P＜0.01， P＜0.05）。
　　6.肺組織中α1-AT：C組與B組比較，C（低、中、高劑量）組肺組織中α1-AT表達明顯高于B組有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），B組與D組比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.0