沉默Glypican-3基因增強(qiáng)人肝癌細(xì)胞HepG2對(duì)化療藥物至凋亡作用的敏感性.pdf_第1頁
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1、Glypican-3(GPC3)為膜性硫酸乙酰肝素多糖蛋白，通過糖基磷脂酰肌醇(GPI)結(jié)合于細(xì)胞表面，是硫酸類肝素糖蛋白聚糖(glypican)家族成員?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)在肝癌細(xì)胞中高度表達(dá)并參與其發(fā)生發(fā)展。
　　 目的：
　　 沉默人肝癌細(xì)胞HepG2的GPC3基因表達(dá)，觀察其對(duì)5-氟尿嘧啶(5-FU)和順鉑(CDDP)的藥物敏感性及細(xì)胞凋亡情況的影響。
　　 方法：
　　 1.構(gòu)建干擾GPC3的shRNA載

2、體，將其轉(zhuǎn)染至肝癌細(xì)胞，并設(shè)立對(duì)照組。
　　 2.Western blot測(cè)定GPC3蛋白表達(dá)情況。
　　 3.利用MTT法測(cè)定轉(zhuǎn)染后肝癌細(xì)胞對(duì)5-FU及順鉑的藥物敏感性。
　　 4.采用流式細(xì)胞技術(shù)觀察轉(zhuǎn)染后肝癌細(xì)胞在5-FU及順鉑作用下的細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果：
　　 轉(zhuǎn)染shRNA的肝癌細(xì)胞其GPC3表達(dá)陰性；其對(duì)5-FU及順鉑的藥物敏感性增加（P＜0.05）；細(xì)胞凋亡較對(duì)照組增加（P＜

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