枸杞多糖通過抑制線粒體介導的細胞凋亡通路對小鼠局灶性腦缺血損傷的保護作用.pdf

1、目的：觀察枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide,LBP）對小鼠局灶性腦缺血損傷的保護作用，并探討LBP對小鼠腦缺血損傷保護作用的可能作用機制。
　　方法：雄性ICR小鼠，連續(xù)灌胃給藥LBP(10、20和40mg/kg)、尼莫地平（4mg/kg）和生理鹽水7天后，采用線栓法制備小鼠大腦中動脈阻塞腦缺血損傷模型。腦缺血2小時再灌注24小時后，對小鼠神經(jīng)功能缺陷進行評分，用TTC染色法測定小鼠腦梗死體積

2、，用HE染色方法觀察小鼠腦組織形態(tài)學變化。采用TUNEL染色法檢測小鼠缺血區(qū)腦組織神經(jīng)細胞凋亡數(shù)量，采用分光光度法測定小鼠缺血側腦組織Caspase-3蛋白的活性，采用免疫熒光和Western blot方法檢測小鼠損傷側腦組織內(nèi)Bax，Bcl-2，CytC，Caspase-3，Caspase-9和裂解PARP-1蛋白的表達情況。
　　結果：與模型組比較，LBP(20和40mg/kg)組能顯著降低小鼠腦組織梗死率(P<0.05)和小

3、鼠神經(jīng)功能缺陷評分(P<0.05)；與模型組相比，LBP（10、20和40mg/kg）組可以不同程度改善小鼠腦缺血損傷后腦組織神經(jīng)元的異常形態(tài)變化，并能顯著降低小鼠缺血區(qū)腦組織內(nèi)凋亡神經(jīng)元數(shù)量(P<0.05)。腦缺血損傷再灌注24小時后，與假手術組相比，模型組小鼠缺血側腦組織內(nèi)Caspase-3蛋白的活性明顯升高（P<0.01），LBP(40mg/kg)治療組和尼莫地平陽性藥物組能明顯降低 Caspase-3蛋白在小鼠缺血腦組織內(nèi)的表達

4、(P<0.05)。免疫熒光實驗結果顯示，再灌注24小時后，模型組小鼠缺血側大腦皮層中Bax，CytC和Caspase-3蛋白的表達較假手術組明顯升高（P<0.01），而Bcl-2蛋白的表達顯著降低（P<0.01）。與模型組相比，LBP(40mg/kg)組和尼莫地平組可顯著降低Bax，CytC和Caspase-3蛋白在缺血區(qū)腦組織的表達（P<0.01）并能明顯升高Bcl-2蛋白的表達(P<0.05)。Western blot實驗結果顯示，

5、模型組小鼠腦缺血損傷再灌注24小時后，損傷區(qū)腦組織內(nèi)Bax，CytC，Caspase-3，Caspase-9和裂解PARP-1蛋白的表達較假手術組均明顯升高(P<0.01)，而Bcl-2蛋白的表達顯著減少(P<0.01)。與模型組相比，LBP40mg/kg劑量組和尼莫地平組均可顯著降低Bax，CytC，Caspase-3，Caspase-9和裂解PARP-1蛋白的表達(P<0.05)，并能明顯提高Bcl-2蛋白在小鼠缺血側腦組織中的表達