基底核出血后的錐體束損害及血腫抽吸對其影響的實驗研究.pdf

1、第一部分大鼠基底核腦出血后錐體束改變的顯微和超微結構觀察
　　 目的：研究大鼠基底核腦出血后錐體束的病理變化規(guī)律及特點。
　　 方法：體重250-300g的清潔級雄性SD大鼠72只用作光鏡檢查，隨機分為正常對照組(n=8只)、假手術組(n=32只)，腦出血組(n=32只)，其中假手術組和腦出血組再各分為4個亞組：1d組、3d組、7d組和14d組，每個亞組8只。體重250-300g的清潔級雄性SD大鼠10只用作電鏡檢查，隨

2、機分為正常對照組、腦出血1d組、3d組、7d組和14d組，每組2只。腦出血組將Ⅳ型膠原酶-肝素混合液立體定向注入大鼠基底核誘導形成腦出血；假手術組使用生理鹽水代替Ⅳ型膠原酶-肝素混合液，手術過程同腦出血組；正常對照組不予人為干預，第7天處死。用作光鏡檢查的各組大鼠到達時間點處死后分別采用勞克堅牢藍(1uxolfast blue，LFB)染色、神經(jīng)絲蛋白(neurofilament，NF)免疫組化染色對內(nèi)囊后肢進行觀察，電鏡組大鼠處死后制

3、作電鏡標本在透射電鏡下對內(nèi)囊后肢進行觀察。
　　 結果：假手術組大鼠未見明顯的神經(jīng)功能缺損體征，Ⅳ型膠原酶-肝素聯(lián)合誘導的腦出血大鼠均具有明顯的神經(jīng)功能缺損。光鏡發(fā)現(xiàn)正常對照組和假手術組錐體束髓鞘染成藍色，著色清晰，腦出血組髓鞘有不同程度的丟失，1d到3d逐漸加重，7d開始再生修復。正常對照組和假手術組錐體束軸突數(shù)量多，排列密集，腦出血組軸突數(shù)量和排列都發(fā)生變化，1d到7d軸突損傷持續(xù)加重，14d軸突光度值(0.09±0.01)

4、有所增加，但與7d(0.10±0.02)無顯著性差異(P＞0.05)。電鏡顯示正常對照組錐體束髓鞘呈圓形，板層清晰，軸突位于髓鞘中心，形狀規(guī)則，腦出血1d錐體束髓鞘松解，軸突水腫，部分無髓軸突崩解壞死消失，3d髓鞘松解、空泡樣變性，局部髓鞘消失、厚薄不均，軸突水腫嚴重，甚至壞死崩解。
　　 結論：Ⅳ型膠原酶-肝素能成功建立具有典型神經(jīng)功能缺損的大鼠腦出血模型。大鼠腦出血后1w內(nèi)錐體束損傷呈進行性加重，提示應早期和超早期予以干預治

5、療以減輕損傷和促進修復。
　　 第二部分微創(chuàng)血腫抽吸治療對基底核腦出血大鼠錐體束的干預影響
　　 目的：探討微創(chuàng)血腫抽吸治療對錐體束修復和神經(jīng)功能改善的作用，為臨床外科治療中等量腦出血提供基礎研究的理論依據(jù)。
　　 方法：體重250-300g的清潔級雄性SD大鼠64只，隨機分為正常對照組(n=8只)、假手術組(n=24只)，腦出血自然恢復組(n=8只)，腦出血微創(chuàng)血腫抽吸組(n=24只)，其中假手術組和腦出血微創(chuàng)

6、血腫抽吸組再各分為3個亞組：6h組、12h組和24h組，每個亞組8只。使用Ⅳ型膠原酶-肝素誘導大鼠基底核腦出血，微創(chuàng)血腫抽吸組分別在注入膠原酶后4h、10h或22h向原注射點注入尿激酶3000U，2h后沿原針道緩慢抽吸，假手術組用生理鹽水代替尿激酶，方法同抽吸組。2周后采用“樓梯測試”前肢功能測試方法對各組大鼠進行神經(jīng)功能評分，經(jīng)心臟灌注取腦組織，對內(nèi)囊后肢前部行神經(jīng)絲蛋白(neurofilament，NF)和神經(jīng)生長相關蛋白(grow

7、th associated protein-43，GAP-43)免疫組化染色，利用圖像分析軟件對免疫組化結果進行光密度分析。
　　 結果：腦出血微創(chuàng)血腫抽吸組前肢抓取功能均高于自然恢復組(P＜0.05)，其中腦出血后6h抽吸組高于12h抽吸組和24h抽吸組(P＜0.05)，12h抽吸組和24h抽吸組之間無顯著差異(P＞0.05)。NF免疫組化染色結果顯示微創(chuàng)血腫抽吸組NF染色陽性纖維明顯多于自然恢復組(P＜0.05)，6h抽吸組

8、的NF染色陽性纖維相對于12h和24h抽吸組表達更多(P＜0.05)。GAP-43染色發(fā)現(xiàn)各抽吸組GAP-43的表達高于自然恢復組(P＜0.05)，抽吸組之間比較，24h抽吸組GAP-43的表達最弱，與其它兩抽吸組比較具有顯著性(P＜0.05)，6h抽吸組和12h抽吸組間無明顯差異(P＞0.05)。
　　 結論：“樓梯測試”前肢功能測試評分能較好反映錐體束的損傷情況。腦出血后24h內(nèi)，尤其是6h內(nèi)即予以微創(chuàng)血腫抽吸治療能減輕錐體