CYP2B6基因多態(tài)性及性別對依法韋倫在健康受試者體內藥動學的影響.pdf

1、研究目的：
　　依法韋倫是一種有效治療Ⅰ型艾滋病的非核苷類逆轉錄酶抑制劑，其主要代謝酶是細胞色素P450(CYP2B6)，CYP2B6基因具有高度多態(tài)性，從而影響依法韋倫的體內代謝。本試驗目的是探討CYP2B6基因多態(tài)性對依法韋倫人體內藥動學的影響，為依法韋倫臨床安全用藥提供依據，從而實現個體化用藥。
　　研究方法：
　　1.研究對象
　　篩選40名健康受試者參與該試驗，男26例，女14例。平均年齡24.33±1

2、.57y，平均體重60.07±7.46kg，平均身高171.31±6.25cm。女性懷孕測試均為陰性。所有受試者均不抽煙，無飲酒史。經血尿常規(guī)、肝腎功能及心電圖檢查，各項檢查指標均正常。所有受試者均無藥物過敏史，在參與試驗前兩周及實驗期間未服用其它任何藥物。
　　2.試驗方案
　　受試者在服藥前禁食10h，均與早晨7時用240ml溫開水送服依法韋倫片600mg。分別于給藥前及給藥后0.5，1，2，3，3.5，4，4.5，5，

3、5.5，6，8，12，16，24，48，72，96，120，144和168h取外周血。所得血液樣本放置-70℃保存。服藥6h后統(tǒng)一進食標準餐。
　　3.基因分型
　　用“酚-氯仿”法提取基因組DNA;采用聚合酶鏈反應(PCR)方法擴增CYP2B6目的片段，產物經測序確定位點基因型。
　　4.依法韋倫濃度測定
　　采用HPLC-MS/MS測定血漿樣品中依法韋倫的濃度。
　　色譜條件:色譜柱為Phenomene

4、x Synergi4u，Polar-RP(2.0(×)50mm，4μm)，流動相為醋酸銨（0.8g/L，PH=7.5）∶乙腈=50∶50(v∶v)，流速為1.0ml/min，柱溫為常溫25℃。進樣體積為20μL。
　　質譜條件:質量分析器操作使用負離子模式(ESI-)電噴霧源，使用多反應離子監(jiān)測(MRM）采集。氮（超高壓N2）作為脫溶劑氣體設置在389L·h-1。對于依法韋倫和IS用MRM檢測為選定的離子轉換分別是:m/z314.

5、0/68.9amu和319.0/68.9amu。
　　5.統(tǒng)計分析
　　使用DAS2.0軟件進行相關藥動學參數的計算。Cmax、Tmax為實測值。數據結果用(x)±s表示。不同基因型間藥動學參數使用SPSS13.0進行單因素方差分析，不同性別間藥動學參數比較采用t檢驗。P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1.依法韋倫血漿藥物濃度測定的方法學考察
　　藥動學方法的精密度RSD＜10％，，回收率平均

6、為97.8％，凍融穩(wěn)定性變化小于5％，最低檢測限25ng/ml，標準曲線為y=0.000814x+0.000228，r2=0.9998。各項指標均符合生物樣品分析要求。
　　2.CYP2B6基因多態(tài)性及對依法韋倫藥動學參數的影響
　　根據CYP2B6基因分型結果，將受試者分為CYP2B6*1/*1、*1/*6和*6/*6三組，分別為29、8和3例。各組消除半衰期t1/2分別為85.88±23.08、94.25±25.76和1

7、62.11±82.55h，經方差分析有顯著性差異(P=0.001);AUC0-t分別為113674.47±14579.31、134421.24±42135.48和147947.86±34953.87h·ng/ml，組間有顯著性差異(P=0.017);AUC0-INF分別為147630.24±24859.60、188526.79±73715.22和278934.17±120841.84h·ng/ml，組間有顯著性差異(P=0.000);T

8、max分別為3.69±1.29、3.19±1.74和4.00±0.50h，Cmax分別為3638.15±620.71、3800.41±1037.67和3971.04±1050.89ng/ml，但組間均無顯著性差異(P=0.0593和P=0.0693)。
　　3.性別差異對依法韋倫藥動學參數的影響
　　男、女受試者t1/2分別為93.33±23.59、121.22±42.20h，兩組間有顯著性差異(P=0.001);AUC0-

9、t分別為137537.36±28947.29、174646.77±47294.96h·ng/ml，兩組間有顯著性差異(P=0.012);AUC0-INF分別為149105.73±34178.49、20761.81±75245.47h·ng/ml，兩組間有顯著性差異(P=0.002);Tmax分別為3.62±1.39、3.6±1.40h，Cmax分別為3571.40±692.34、174646.77±47294.96ng/ml，但兩組間均