靶向survivin的siRNA聯(lián)合5-FU轉(zhuǎn)染抑制肝細(xì)胞株HepG2增殖的研究.pdf

1、靶向survivin的SiRNA聯(lián)合5FU轉(zhuǎn)染抑制肝細(xì)胞株HepG2增殖的研究摘要目的：研究靶向survivin的(小分子干擾RNA)siRNA和(氟尿嘧啶)5一FU聯(lián)用對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2的增殖抑制及凋亡的影響。方法：將HepG2細(xì)胞分為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、5FU處理組、siRNA轉(zhuǎn)染組、5FUsiRNA轉(zhuǎn)染組。轉(zhuǎn)染采用脂質(zhì)體法。RTPCR法檢測(cè)HepG2細(xì)胞survivinmRNA轉(zhuǎn)錄水平；MTT法檢測(cè)靶向survivin的si

2、RNA和5FU對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HepG2細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果：空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、5一FU處理組survivinmRNA表達(dá)無(wú)明顯變化(PO05)，siRNA轉(zhuǎn)染組、5一FUsiRNA轉(zhuǎn)染組survivinmRNA表達(dá)明顯下降(F=280326，q=472～734，PO05)。5FUsiRNA轉(zhuǎn)染組增殖抑制率為5158％135％，與其它各組相比抑制率明顯增高(F=280326，q=527’984，PO05

3、)。5FUsiRNA組與其它各組相比細(xì)胞凋亡率明顯增高(F=1356868，q=11047“32716，PO01)。結(jié)論：將靶向survivin的siRNA和5一FU聯(lián)合應(yīng)用可以顯著抑制肝癌細(xì)胞survivin基因表達(dá)，并協(xié)同抑制HepG2細(xì)胞增殖，共同發(fā)揮誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用。關(guān)鍵詞：Si砌悄；survivin；肝癌；5FU≥i妒f，。目錄弓I言1第1章材料與方法311材料3111主要試劑與儀器3112細(xì)胞株312方法4121surviv

4、in基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建4122細(xì)胞分組和轉(zhuǎn)染”4123MTT法檢測(cè)細(xì)胞增值抑制率的變化一4124流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡比率5125RTPCR術(shù)檢測(cè)survivinmRNA水平5126統(tǒng)計(jì)學(xué)分析5第2章結(jié)果621各組HepG2細(xì)胞增殖抑制率比較622各組細(xì)胞凋亡比率比較623RTPCR法檢測(cè)survivinmRNA水平8第3章討論第4章結(jié)論參考文獻(xiàn)綜述綜述參考文獻(xiàn)攻讀學(xué)位期間的研究成果致謝學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明、學(xué)位論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明300