姜黃素對金黃色葡萄球菌引起的急性肺損傷的保護作用及其機制研究.pdf

1、急性肺損傷(acutelunginjury，ALI)是臨床上常見的造成嚴重的肺彌散功能障礙的急危重癥，嚴重的ALI或ALI的最終嚴重階段被定義為急性呼吸窘迫綜合征(acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS)。其病理特點為肺泡毛細血管內皮細胞和肺泡上皮細胞損傷，表現(xiàn)為廣泛肺水腫和微小肺不張。根據(jù)1994年歐美聯(lián)席會議提出的ALI/ARDS診斷標準，2005年美國ALI、ARDS發(fā)病率分別在每年79/10萬

2、和59/10萬，給家庭及社會帶來了沉重的經濟負擔。進一步研究ALI的分子機制，探索有效的防治措施，對提高ALI的生存率，減輕肺組織損傷意義重大。
　　 嚴重感染是ALI/ARDS的最常見原因。金黃色葡萄球菌(下簡稱金葡菌，S-A)是臨床最重要的革蘭陽性球菌，具有極強的致病力以及較高致死率。因此如何通過減輕金葡菌誘發(fā)的急性肺組織損傷，是本研究的出發(fā)點。
　　 姜黃素(簡寫CUR)是從姜黃屬中藥姜黃中提取出來的一種酚性色素，

3、它是一類多效的天然活性物質，在藥學上有廣泛的應用價值，但對SA誘發(fā)的ALI的作用如何目前并不清楚。本研究主要通過建立體內動物模型觀察CUR對SA誘導的ALI的影響及可能機制，以期為臨床減輕SA誘發(fā)的急性肺損傷尋找新的干預手段。
　　 目的：建立金黃色葡萄球菌(SA)致小鼠急性肺損傷的動物模型，探索姜黃素(CUR)在SA致小鼠急性肺損傷中的作用及其相關機制。
　　 方法：8周齡C57/BL6雌鼠隨機分為對照組、SA模型組和

4、CUR干預組。對照組氣道滴注PBS(50μl)，SA模型組氣道滴注SA(1×108CFU，50μl)，CUR干預組為氣道滴注SA前兩小時行腹腔注射CUR(50mg/kg)。觀察各組小鼠肺組織病理學、肺血管通透性測定、肺灌洗液細胞總數(shù)、中性粒細胞計數(shù)分類；采用ELISA檢測BALF中炎癥因子改變，采用RT-PCR及Q-PCR測定肺組織炎癥因子及抗炎因子表達，采用WersternBlot測定炎癥信號通路中重要因子的表達、凝血酶原PAI-1表

5、達及高遷移率蛋白1(HMGB1)表達。觀察HMGB1抗體干預對小鼠生存率的影響。建立體外SA感染小鼠BMM細胞模型，WersternBlot檢測BMM細胞早期p-IκB表達。
　　 結果：本實驗以氣道滴注金葡菌建立小鼠ALI模型，通過對組織病理學、肺血管通透性、炎癥因子表達等多項指標檢測，符合ALI表現(xiàn)，造模成功。與SA模型組比較，CUR干預組肺組織病理損傷明顯減輕，在SA感染小鼠12h后，肺泡灌洗液細胞總數(shù)與白細胞計數(shù)顯著降低

6、(P<0.01)；炎癥因子(如KC、MIP-2、INF-α、IL-1β等)下調(P<0.05)，抗炎因子(如SOCS1、CD200等)顯著上調(P<0.01)，炎癥通路信號分子p-Erk1/2下調。同時體外實驗顯示CUR可抑制SA感染的BMM細胞p-IκB蛋白的表達。且BALF中總蛋白及肺組織凝血酶原PAI-1顯著降低(P<0.01)，肺血管滲透性明顯改善(P<0.01)。此外，體內實驗發(fā)現(xiàn)CUR還可抑制HMGB1在SA感染后的早期表達