
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1、目的:應(yīng)用冠狀動(dòng)脈懸吊建立急性心肌缺血后存活心肌模型,同時(shí)行冠狀動(dòng)脈結(jié)扎、建立急性心肌梗死模型,結(jié)合病理學(xué)所見(jiàn),確定模型建立成功與否以及是否適合多層螺旋CT檢查。觀察急性心肌缺血后心肌細(xì)胞活性與相應(yīng)CT灌注掃描改變之間的相關(guān)性,確定MSCT動(dòng)態(tài)增強(qiáng)檢查能否區(qū)分存活與梗死心肌。 方法: 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康新西蘭大白兔45只,體重2.5±0.3kg。隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(又分為冠狀動(dòng)脈結(jié)扎組及冠狀動(dòng)脈懸吊組,分別簡(jiǎn)稱結(jié)扎組與懸吊
2、組)與對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組40只,結(jié)扎與懸吊組各20只,對(duì)照組5只。 1.2 模型制作1.2.1 冠狀動(dòng)脈結(jié)扎:20只動(dòng)物速眠新0.2ml肌肉注射5min后,2%苯巴比妥自兔耳緣靜脈分次緩慢注射維持麻醉狀態(tài),動(dòng)物仰臥固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái),手術(shù)部位常規(guī)備皮、消毒、鋪巾后,取胸骨左緣0.5cm~1.0cm縱行切口,切開(kāi)胸大肌與胸小肌,離斷第4~6肋骨,暴露心包前壁。仔細(xì)剪開(kāi)心包,暴露左心耳,自其后方下緣尋找左冠狀動(dòng)脈,從左心耳下緣3~5mm處
3、以4號(hào)縫合線結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支。生理鹽水沖洗手術(shù)區(qū),逐層縫合胸壁。 1.2.2 冠狀動(dòng)脈懸吊:20只動(dòng)物,動(dòng)物麻醉及開(kāi)胸方法同前,暴露左冠狀動(dòng)脈前降支后,于前降支左心耳下緣3~5mm處以4號(hào)縫合線懸吊15min,撤出縫線。 1.2.3 對(duì)照組5只動(dòng)物,麻醉及開(kāi)胸方法同實(shí)驗(yàn)組,僅暴露冠狀動(dòng)脈前降支,不做結(jié)扎及懸吊。 1.3 實(shí)驗(yàn)組模型成功標(biāo)準(zhǔn)通過(guò)術(shù)后肉眼及病理學(xué)檢查(TTC、HE、免疫組化)判斷模型是否建立成功。TTC染
4、色陽(yáng)性,HE染色可見(jiàn)壞死心肌細(xì)胞,免疫組化可見(jiàn)免疫缺染區(qū),證實(shí)有心肌壞死,模型建立成功。 1.4 CT灌注或動(dòng)態(tài)增強(qiáng)檢查CT檢查前經(jīng)耳緣靜脈注入艾美洛爾0.5ml,將心率控制在60~80次/min(正常心率為100~120次/min)。應(yīng)用GE層LightSpeed 16多層螺旋CT。動(dòng)物仰臥固定。電影(cine)掃描序列,掃描范圍自心底至心尖水平。掃描參數(shù):120kV,100mA,球管旋轉(zhuǎn)速度0.4s/周,準(zhǔn)直厚度2.5mm,
5、采集模式2.5mm×8。先行定位掃描及平掃,然后經(jīng)耳緣靜脈高壓注射器注入濃度為300mgI/ml的碘海醇或碘比醇(總量4ml,速率0.3ml/s),共采集源圖像1200幀,10min后行興趣層面延遲掃描,準(zhǔn)直厚度2.5mm。應(yīng)用adw4.2灌注軟件行后處理,根據(jù)灌注曲線,選擇單一層面選取多個(gè)興趣區(qū)(ROI),測(cè)定峰值與峰值時(shí)間,測(cè)量延遲CT值,測(cè)量3次,并取均值。 1.5 病理學(xué)檢查過(guò)量麻醉后處死動(dòng)物后取出心臟,生理鹽水沖洗,對(duì)
6、照CT檢查,與掃描軸面一致、按2.5mm厚度切片,部分標(biāo)本應(yīng)用2%TTC 37℃水箱孵浴30min。其余標(biāo)本應(yīng)用10%多聚甲醛固定,HE及免疫組化染色。觀察心肌細(xì)胞有無(wú)腫脹,壞死,有無(wú)血管內(nèi)皮細(xì)胞斷裂,血管周圍間隙有無(wú)增寬。 1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對(duì)所得興趣區(qū)CT峰值及峰值時(shí)間、延遲掃描CT值及免疫組化結(jié)果應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,以α=0.05為顯著性標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果: 77.5%動(dòng)物手術(shù)建立模型成功,100
7、%模型完成CT檢查,取得良好圖像。如何良好? 結(jié)扎組興趣區(qū)到達(dá)峰值時(shí)間(65±3.1sec)長(zhǎng)于對(duì)照組(43±2.2sec),兩組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=3.682,p=0.001)。結(jié)扎組強(qiáng)化峰值(157.6±23.6Hu)低于對(duì)照組(266.1±18.5Hu),兩組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=3.885,p=0.001)。 結(jié)扎組、懸吊組CT灌注曲線相比,結(jié)扎組到達(dá)峰時(shí)間(65±3.1sec)較懸吊組(51±1.8sec
8、)長(zhǎng),兩組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=12.09,p=0.002)。結(jié)扎組CT峰值(157.6±23.6Hu)低于懸吊組CT峰值(210.9±16.8Hu),兩組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=9.068,p=0.038)。延遲對(duì)比增強(qiáng)掃描結(jié)扎組明顯延遲強(qiáng)化(89±15.3Hu),懸吊組輕度強(qiáng)化(58±13.9Hu),兩組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=10.07,p=0.0037)。 結(jié)論: 1.懸吊法與結(jié)扎法能分別成功建立兔缺血心肌模型
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