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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
近期研究表明慢病毒病毒可以攜帶外源的自殺基因來(lái)殺傷腫瘤細(xì)胞。在本研究中,我們應(yīng)用慢病毒介導(dǎo)自殺基因結(jié)合前體藥物(DFDC和ARAT)評(píng)估對(duì)乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用。
方法
為了評(píng)估突變型Dm-dnk的磷酸化作用,我們構(gòu)建了表達(dá)突變型Dm-dnk的慢病毒載體轉(zhuǎn)染乳腺癌細(xì)胞Bcap-37,Western-Blot及RT-PCR的方法檢測(cè)突變型Dm-dnk在Bcap-37中的表達(dá),并通過(guò)酶活性分析轉(zhuǎn)
2、染前與轉(zhuǎn)染后酶活性的差別。最后給予不同濃度的前藥(DFDC,ARAT),觀察該體系對(duì)Bcap-37的殺傷作用。
結(jié)果
熒光顯微鏡下觀察到大量的綠色熒光蛋白,RT-PCR及Western Blot方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)突變型Dm-dnk在Bcap-37中有表達(dá),乳腺癌細(xì)胞感染Lenti-CMV-dnkmut后保持其酶活性并且顯示出其隨前藥濃度遞增的殺傷效果。
結(jié)論
Lenti-Dm-dnkmu
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