威靈仙總皂苷的分離純化及對(duì)急性早幼粒細(xì)胞白血病NB4細(xì)胞體外作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：制備純化的威靈仙總皂苷，體外作用于急性早幼粒細(xì)胞白血病NB4細(xì)胞，研究威靈仙總皂苷對(duì)NB4細(xì)胞的作用機(jī)制，為臨床用藥提供理論依據(jù)。 方法：①運(yùn)用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)威靈仙提取液進(jìn)行分離純化，得到威靈仙總皂苷，并對(duì)其含量進(jìn)行檢測(cè)。②設(shè)置多個(gè)濃度梯度的威靈仙總皂苷藥物組，觀察用藥后不同時(shí)間點(diǎn)的NB4活細(xì)胞數(shù)，計(jì)算生長(zhǎng)抑制率；Wright's-Giemsa染色計(jì)數(shù)法和NBT還原試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞分化率，透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞術(shù)

2、檢測(cè)CD11b/CD33表達(dá)情況，Annexin V法測(cè)定細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果：⑴使用大孔樹(shù)脂法純化威靈仙總皂苷，精密性試驗(yàn)和重現(xiàn)性試驗(yàn)的RSD分別為0.85％和1.35％：威靈仙總皂苷主要富集于70％乙醇洗脫液部分，總皂苷含量達(dá)23.14±0.12％，其回收率達(dá)到4.55％，其RSD為0.89％。⑵威靈仙總皂苷對(duì)NB4細(xì)胞有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，且具有劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系；在本實(shí)驗(yàn)條件下，威靈仙總皂苷對(duì)NB4細(xì)胞無(wú)明顯的誘導(dǎo)分化作用