Cycloxygenase-2在急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、研究背景 急性胰腺炎是以胰腺間質(zhì)水腫、出血、腺泡細(xì)胞空泡變性、壞死及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)為病理特征、病變程度不一、結(jié)局難以預(yù)料的急性炎癥性疾病。急性胰腺炎常伴有全身炎癥反應(yīng)，約20[％]發(fā)展為重癥急性胰腺炎(多器官功能障礙或衰竭)，其病死率可高達(dá)40[％]以上。因此，SAP仍是目前常見的、嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病。 最近，前列腺素及源于前列腺素的炎癥介質(zhì)在介導(dǎo)急性胰腺炎全身炎癥反應(yīng)中的作用受到密切關(guān)注。環(huán)氧合酶(COX)是前列

2、腺素合成的關(guān)鍵限速酶，COX有兩種異構(gòu)體，COX-l為組成式表達(dá)，產(chǎn)生的前列腺素主要維持生理功能，COX-2是誘導(dǎo)性表達(dá)異構(gòu)體，在絕大多數(shù)正常組織無(wú)表達(dá)，但可在包括急性胰腺炎在內(nèi)的炎癥疾病中過(guò)表達(dá)，提示COX-2在急性胰腺炎的形成和發(fā)展中起著重要作用。迄今，有關(guān)COX-2在重癥急性胰腺炎及相關(guān)性肺損傷中的精確作用及機(jī)制尚不清楚。 目的 本研究旨在探討COX-2在實(shí)驗(yàn)性重癥急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷中的作用及機(jī)制。全文分兩部分

3、：在第一部分，主要探討COX-2在牛磺膽酸鈉誘導(dǎo)的大鼠急性出血壞死性胰腺炎肺組織中的動(dòng)態(tài)表達(dá)情況與表達(dá)定位，并探討COX-2表達(dá)與肺損傷程度的相關(guān)性；在第二部分，主要評(píng)價(jià)COX-2高選擇性抑制劑Celecoxib對(duì)大鼠急性出血壞死性胰腺炎胰腺和肺組織損傷是否具有保護(hù)作用并重點(diǎn)探討方法以1ml／kg的劑量逆行胰膽管注射滅菌的5％?；悄懰徕c，誘導(dǎo)Sprague-Dawley大鼠急性出血壞死性胰腺炎模型；對(duì)照組：用等劑量的無(wú)菌生理鹽水替代?；?/p>

4、膽酸鈉逆行胰膽管注射；Celecoxib處理組：在急性出血壞死性胰腺炎大鼠模型誘導(dǎo)前2小時(shí)，以50mg／kg的劑量通過(guò)灌胃給予Celecoxib預(yù)處理；動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)。按計(jì)劃于各時(shí)間點(diǎn)處死各組大鼠，收集血清及胰腺和肺組織。肺水腫嚴(yán)重程度以肺組織濕干重比表示；以碘-淀粉比色法測(cè)定血清淀粉酶，硝基還原法測(cè)定血清NO，采用BECKKAN DU640型分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定；放射免疫法測(cè)定血清TNF-α水平，動(dòng)態(tài)濁度法測(cè)

5、定血清內(nèi)毒素水平。H．E染色用于胰腺和肺組織損傷的病理學(xué)評(píng)價(jià)，肺組織PTAH染色顯示微血栓；根據(jù)EBD標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用比色法測(cè)定肺組織中EBD含量以反映肺血管通透性；采用BECKMAN DU640型分光光度計(jì)測(cè)定肺組織中髓過(guò)氧化酶、丙二醛和誘導(dǎo)性一氧化氮合酶活性；免疫組織化學(xué)法測(cè)定肺組織COX-2，NF-κ8和ICAM-1的表達(dá)；RT-PCR檢測(cè)肺組織中COX-2mRNA，iNOS mRNA，TNF-α mRNA和TFmRNA的表達(dá)。

6、 結(jié)論 本研究結(jié)果清楚表明，COX-2是SAP早期反應(yīng)基因，在急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷的發(fā)生中起著關(guān)鍵的作用。COX-2的作用機(jī)理可能與其介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷與活化，導(dǎo)致肺微循環(huán)障礙和啟動(dòng)炎癥反應(yīng)有關(guān)。 Celecoxib具有顯著改善急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷的作用。其機(jī)制可能通過(guò)抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活化：(1)抑制COX-2表達(dá)及其介導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷與活化，下調(diào)ICAM-1及TF的表達(dá)，改善微循環(huán)，抑制炎癥及