P物質(zhì)在急性胰腺炎相關(guān)肺損傷發(fā)病機制中的作用及清胰湯干預(yù)的實驗研究.pdf

1、目的：本實驗將通過觀察P物質(zhì)在重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis SAP）肺損傷模型大鼠肺組織中的變化規(guī)律，來探討重癥胰腺炎病情的發(fā)展與P物質(zhì)（substance P SP）及其受體（neurokinin-1 receptor NK-1R）的關(guān)系，從而進(jìn)一步揭示急性重癥胰腺炎相關(guān)肺損傷的發(fā)病機制，同時挖掘清胰湯的治療作用。 方法：健康Spraghe-Dawley（SD）大鼠96只，體重220-28

2、0克，雌雄不拘，隨機分為四組（SAP模型組，假手術(shù)組，拮抗劑組，清胰湯治療組）每組24只。SAP模型組：胰膽管逆行注射1.5%的去氧膽酸鈉溶液（0.1ml/100g）建立SAP肺損傷模型；假手術(shù)組：腹部手術(shù)開腹后僅輕輕翻動胰腺，不經(jīng)胰膽管給藥；拮抗劑組：制模成功后經(jīng)尾靜脈注射NK-1R拮抗劑spantide（0.00125%）0.5ml，其他組注射等量生理鹽水；清胰湯組：在制模后以清胰湯灌胃一次（1ml/100g），其他組灌等量生理鹽水

3、。各組又分為6小時，12小時，24小時組，分別在造模后6小時，12小時，24小時剖殺取材。采用雙抗夾心enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）法測定大鼠肺組織中P物質(zhì)含量和TNF-a水平；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測NK-1R與水通道蛋白1（Aquaporin1 AQP1）在肺組織中的表達(dá)及組織定位；真空干燥法測定肺濕干重（W/D）比值；按試劑盒說明進(jìn)行肺髓過氧化物酶（myeloperoxidase

4、MPO）含量測定；碘-淀粉比色法進(jìn)行血清淀粉酶（amylase AMY）含量測定，大體及鏡下觀察肺臟病理學(xué)改變。 結(jié)果：（1）SAP模型各組與相同時間點假手術(shù)組相比：血清AMY水平、肺組織P物質(zhì)水平、TNF-α水平、肺MPO活性和W/D值升高明顯（P<0.01）；肺組織出現(xiàn)水腫、充血、中性粒細(xì)胞浸潤和灶性肺不張等改變，并隨時間延長而加重。NK-1R表達(dá)升高（P<0.05），而AQP1表達(dá)下降（P<0.05）。（2）拮抗劑組與相同

5、時間點SAP模型組相比：血清AMY水平、肺組織P物質(zhì)水平、TNF-a水平、MPO水平和W/D值降低（P<0.01）；肺組織病理改變明顯減輕；NK-1R表達(dá)下降（P<0.05）而AQP1表達(dá)升高（P<0.05）。（3）清胰湯組與相同時間點SAP組相比：血清AMY水平、肺組織P物質(zhì)水平、TNF-a水平、MPO水平和W/D值降低（P<0.01）；肺組織病理改變明顯減輕；NK-1R表達(dá)下降（P<0.05）而AQPI表達(dá)升高（P<0.05）。（4

6、）清胰湯組與同時間點拮抗劑組相比血清AMY水平、肺組織P物質(zhì)水平、TNF-a水平、MPO水平降低（P<0.05），NK-1R及AQP1表達(dá)和W/D值差異不明顯（P>0.05）。大鼠肺組織中P物質(zhì)與TNF-a水平具有明顯的正相關(guān)性（0