STAT3在重癥急性胰腺炎肺損傷中的作用及清胰湯等的調(diào)控作用和機(jī)制.pdf

1、目的：觀察急性水腫性和壞死性胰腺炎模型胰腺STAT3活化程度的差異，以及清胰湯、燈盞花素對急性壞死性胰腺炎時STAT3活性的影響、及對胰腺、肺損傷的治療作用，從而探討STAT3在急性胰腺炎重癥化中的作用和清胰湯、燈盞花素治療重癥急性胰腺炎并發(fā)肺損傷的機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.健康雄性balb/c小鼠隨機(jī)分為3組（n=8）?？瞻捉M（Control，Con組）、輕癥急性胰腺炎(mild acute pancreatit

2、is，MAP組)、重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP組）?？瞻捉M給予腹腔注射0.9％ NaCl；MAP組腹腔注射Cerulein（50ug/kg/次，1次/小時）；SAP組腹腔注射Cerulein（50ug/kg/次，1次/小時）及LPS(在Cerulein第一次注射后即注射，10mg/kg)；各組在造模后2h和6h分別麻醉處死動物取血檢測血清淀粉酶的活性變化；取胰腺稱重，計(jì)算胰腺濕重比；取胰腺、

3、肺組織，HE染色觀察組織病理學(xué)改變；取肺組織，檢測髓過氧化物酶（MPO）的活性，以評價肺組織中性粒細(xì)胞浸潤程度；提取胰腺蛋白，經(jīng)Western-Blot檢測磷酸化STAT3的變化。
　　 2.健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為4組（n=8），A組：空白組、B組：L-精氨酸組（L-arginine組）、C組:L-arg+清胰湯組、D組：L-arg+燈盞花素組。除空白組（腹腔注射0.9％ NaCl）外，其余各組給予腹腔注射20％ L-精氨酸（

4、3g/kg×2次）；C組和D組在第二次注射20％ L-arg 0.5h后分別給予清胰湯濃縮液灌胃(10ml/kg)及燈盞花素注射液腹腔注射（100mg/kg）。在造模后72h麻醉處死動物取血檢測血清淀粉酶的活性變化；取胰腺、肺組織，HE染色觀察病理學(xué)改變；取肺組織，檢測髓過氧化物酶（MPO）的活性；提取胰腺蛋白，經(jīng)Western-Blot檢測磷酸化STAT3的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.Cearulein誘發(fā)的輕型胰

5、腺炎（MAP）和重型胰腺炎（SAP）的比較
　　 Cearulein誘發(fā)急性胰腺炎后,與空白對照組比較，MAP和SAP在2h和6h均可見血清淀粉酶活性明顯升高（P<0.05）,胰腺濕重比明顯增加（P<0.05），肺組織MPO顯著增加（P<0.05）；SAP組血清淀粉酶活性、胰腺濕重比、肺組織MPO含量高于MAP組，兩者相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在造模后2h，MAP和SAP組胰腺和肺組織可見到胰腺組織小葉間腫脹，少量炎細(xì)胞浸潤：6h SA

6、P組胰腺可見明顯腫脹,間質(zhì)小血管擴(kuò)張、充血,大量炎細(xì)胞浸潤，并有壞死灶。肺組織可見肺泡間隔明顯水腫、增寬，炎細(xì)胞浸潤，肺泡腔內(nèi)滲出?？瞻捉M和MAP組各時間點(diǎn)均未檢測到胰腺組織P-STAT3的表達(dá)；SAP組可見胰腺p-STAT3表達(dá)，2h表達(dá)最明顯，6h p-STAT3的表達(dá)有所減弱。
　　 2.清胰湯和燈盞花素對L-Arginine誘發(fā)的重型胰腺炎（SAP）的治療作用
　　 L-Arginine作用72h后,可見血清淀粉

7、酶活性明顯升高、胰腺濕重比明顯增加，肺組織MPO顯著增加，與空白對照組比較，差異具有顯著性(P<0.05）；而清胰湯治療組和Bre治療組血清淀粉酶活性、胰腺濕重比、MPO水平明顯降低，與重癥急性胰腺炎組相比,差異具有顯著性(P<0.01)；L-Arginine誘發(fā)后可見胰腺、肺組織明顯的病理學(xué)損傷；清胰湯和Bre治療組胰腺、肺組織損傷程度明顯減輕?？瞻捉M胰腺組織未檢測到p-STAT3的表達(dá)；L-Arginine誘發(fā)72h后可見胰腺STA