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文檔簡介
1、目的:建立重癥急性胰腺炎(SAP)動物模型,通過觀察SAP大鼠血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在急性胰腺炎相關(guān)肺損傷(APALI)中的變化及意義,研究SAP大鼠血清及肺組織TNF-α的水平與肺組織損害之間的關(guān)系,為臨床急性胰腺炎合并肺損傷提供理論支持。
方法:選擇30只SPF雄鼠,隨機分成五個組。SAP模型構(gòu)造采用在胰腺被膜下注射的5%牛黃膽酸鈉的方法。對于假手術(shù)組,僅開腹對胰腺進行翻動10次。空白組不做處理。空白組和假手
2、術(shù)組大鼠在造模后6小時進行解剖取標本。造模組大鼠分別在造模后第6小時、12小時、24小時三個時間點解剖并取標本后處死。對于取得的標本,血清淀粉酶使用全自動生化分析儀測定,采用ELISA固(相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗)方法測定大鼠血清中TNF-α的水平變化,同時取部分胰腺組織及肺組織HE染色觀察病理變化,應用血氣分析儀測定動脈血PO2和PCO2,應用免疫組化法檢測肺組織中TNF-α的表達。
結(jié)果:在本課題中重癥急性胰腺炎模型構(gòu)造成
3、功。在試驗過程中檢測到:
?、僭炷=M大鼠血清中胰酶的含量升高,進行統(tǒng)計學處理后提示,差異有顯著性(P<0.05);
?、趯σ认俳M織HE染色后,進行觀察發(fā)現(xiàn)胰腺造模后出現(xiàn)病理損傷,并且病理損傷的嚴重程度隨造模時間的延長而加重,統(tǒng)計學處理后提示差異有顯著性(P<0.05);
?、蹖Ψ谓M織HE染色后,進行觀察發(fā)現(xiàn)肺組織造模后出現(xiàn)病理損傷,并且病理損傷的嚴重程度隨造模時間的延長而加重,統(tǒng)計學處理后提示差異有顯著性(P<0
4、.05);
?、苁褂媒y(tǒng)計軟件對肺組織病理評分、胰腺病理評分、血清TNF-α等指標的變化情況分別進行相關(guān)性分析,可以得出該三項指標兩兩進行相關(guān)分析均呈正相關(guān)。說明隨著時間延長,血清TNF-α的水平上升,胰腺組織的病理損傷程度加重,肺組織的病理損傷程度加重,并且胰腺與肺組織的病理損傷變化呈正相關(guān)。符合的急性重癥胰腺炎將導致肺損傷的理論。
結(jié)論:
①本課題采用胰腺被膜下注射法進行造模,經(jīng)過實驗過程中驗證,大鼠SAP
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