PEDF緩解TNFα誘導草魚肝脂變性機理的初步研究.pdf

1、色素上皮細胞衍生因子(Pigment epithelium-derived factor，PEDF)是具有抑制血管增生，神經營養(yǎng)保護以及抗炎等多種功能的蛋白。對哺乳動物的研究顯示PEDF直接參與調控脂質代謝，但其在硬骨魚類上的作用并不明確。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNFα)是機體內重要的細胞因子，具有調節(jié)細胞分化、增殖、凋亡等功能，并參與調節(jié)肝臟的脂肪變性過程。本研究首次克隆了草魚PEDF基因，

2、采用原核表達、免疫共沉淀、細胞培養(yǎng)和在體注射等手段，在細胞和個體水平上探討了PEDF的基本特性以及其對TNFα誘導的草魚肝脂變性的緩解作用與機制。獲得的主要研究結果如下:
　　1.PEDF由409個氨基酸組成，其DNA包含8個外顯子和7個內含子。蛋白質N端有一個信號肽，C端一個絲氨酸蛋白酶抑制劑結構域。而細胞內的PEDF定位于細胞質，并能與甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase，ATGL)結合。

3、r>　　2.PEDF參與營養(yǎng)代謝的調控過程。PEDF有著廣泛的組織表達，并在脂肪組織中表達最高。其表達隨著脂肪細胞的分化成熟而增加。在體與離體饑餓試驗顯示PEDF的表達均受到影響。油酸與胰島素離體處理肝細胞后，PEDF的表達顯著升高。
　　3.PEDF促進甘油三酯降解。原核表達出有活性的PEDF重組蛋白，WB檢測顯示HIS標簽標記的外源性的PEDF能夠被細胞攝取，甘油三酯測定結果表明PEDF促進甘油三酯降解。
　　4.PED