TNF-α和nNOS在紅霉素預(yù)適應(yīng)大鼠局灶性腦缺血損傷保護(hù)作用中變化的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文TNFα和nNOS在紅霉素預(yù)適應(yīng)大鼠局灶性腦缺血損傷保護(hù)作用中變化的研究姓名：楊日淼申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)外科指導(dǎo)教師：郭宗澤20090301揭示紅霉素預(yù)適應(yīng)對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷保護(hù)作用的機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組健康Wistar雄性大鼠，體重2703009，有中國醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物部提供。將108只雄性大鼠隨即分成3大組，每組再隨即分成6小組，每小組6只，分別為為對(duì)照組和5mg／kg，20m

2、g／kg，35mg／kg，50mg／kg，65mg／kg紅霉素預(yù)適應(yīng)的5個(gè)實(shí)驗(yàn)小組。每大組分別用于TTC染色法腦缺血體積測定，腦水腫測定和RTPCR檢測法及Westernblot法測定nNOS及TNF0【的mRNA和蛋白表達(dá)。2、大鼠局灶性腦缺血模型的建立采用右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈插入線栓法制備大鼠右側(cè)局灶性腦缺血模型。動(dòng)物蘇醒后表現(xiàn)為：①提尾時(shí)左前肢內(nèi)收屈曲；②爬行時(shí)項(xiàng)左側(cè)劃圈；③站立時(shí)向左傾倒。凡具有上述三項(xiàng)體征之一者入選。3、TTC染色將缺

3、血后24小時(shí)的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠，迅速斷頭取腦，從前向后每2mm切片，共切6張。將腦片放入I％TTC生理鹽水中，379C避光孵育30分鐘，待顯色完全(正常腦組織呈紅色，損傷組織呈白色)后，置甲醛溶液中固定。4、腦組織梗死體積測定應(yīng)用圖像分析軟件計(jì)算腦梗死面積及各層面積，由公式V=∑(AIA2)t／2算出梗死體積。其中t為切片厚度，A1和A2分別表示切塊嘴、尾側(cè)梗死面積，同樣方法計(jì)算出同側(cè)大腦半球體積，計(jì)算出梗死灶體積占大鼠腦體積的百分比