溶血磷脂酸受體在卵巢上皮性腫瘤中的表達及生物學意義.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文溶血磷脂酸受體在卵巢上皮性腫瘤中的表達及生物學意義姓名：劉金申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：吳小華單保恩20060301中文摘要癌的治療尋找新的靶點。本課題采用RTPCR和WestemB10t兩種方法，檢測LPA。、LPA2及LPA3三種受體在卵巢上皮癌、卵巢良性上皮腫瘤及卵巢正常上皮中的表達，并分析LPA與卵巢癌的惡性生物學行為之間的關系。方法：本課題實驗所選用的研究標本取自2003年6月至2004年

2、12月河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院婦科的手術切除標本，均經(jīng)術后病理確診的卵巢癌42例(漿液性囊腺癌18例，宮內(nèi)膜樣癌15例，粘液性囊腺癌9例)，卵巢良性上皮性腫瘤8例(漿液性囊腺瘤3例，粘液性囊腺瘤5例)及正常卵巢上皮8例(均取自子宮肌瘤患者，取卵巢表面約2—3mm厚的皮質(zhì))。按FIG02000手術病理分期標準，I—II期9例，III—IV期33例。在病理分級上Gl級6例，G2級25例，G3級1l例。所有組織標本于離體后2小時內(nèi)放入液氮中驟凍，

3、而后保存于一80℃冰箱中待用。(1)：反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(RT—PcR)檢測LPA】、LPA2和LPA3的mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。從組織標本中提取總RNA，并通過電泳和紫外分光光度儀鑒定RNA的完整性及純度。待擴增引物據(jù)NcBIGenBallk的cDNA文庫：LPAl擴增片斷長度為342bp，57一ATCGGGATACCATGATGAGTC一37(U)，57TCCGTTCTAAACCACAGAGTG一37(L)；LPA2擴增片斷長度為29

4、9bp，57一GCTACCGAGAGACCACGCTC一37(U1，5’CTGGGCAGAGGATGTATAGTG一37(L)；LPA3擴增長度為379bp，57。ACAccCATGAAGcTAATGAAG一37(U)，57AGGCATCCAGAGTTTAGGAAG3’(L1；0_actin擴增長度為838bp，57ATCTGGcAcCACACCTTCTACAA—TGAGCTGCG一37fU)，57一CGTACTCCTGCTTGATCC