魚藤魚藤根中魚藤素的分離與衍生研究.pdf

1、魚藤素是除魚藤酮之外植物中最常見的魚藤酮類化合物，魚藤素的實(shí)驗(yàn)研究已證實(shí)在治療惡性腫瘤，尤其是肺部腫瘤方面具有顯著的抑制癌細(xì)胞增殖、改善癥狀等功效，且毒副作用極小。
　　 本課題選取魚藤的魚藤根為研究對(duì)象，旨在探索魚藤素提取、純化的最佳工藝；改進(jìn)和優(yōu)化魚藤素的檢測(cè)手段；采用高速逆流色譜等新工藝新手段進(jìn)一步提高魚藤素的提取率和純度，為以后進(jìn)一步的藥理毒理研究提供材料，并對(duì)魚藤素分子進(jìn)行穩(wěn)定性分析和還原研究。主要研究結(jié)果如下：

2、>　　 1．魚藤的提取條件優(yōu)化
　　 采用正交設(shè)計(jì)探討提取液，料液比，超聲處理時(shí)間，提取時(shí)間等因素對(duì)魚藤素提取含量的影響，尋找最佳的提取工藝。最終確定總黃酮提取的優(yōu)化工藝為：用30倍原料藥的氯仿和甲醇4：1混合溶劑作為提取溶劑，超聲波提取3次，每次超聲處理時(shí)間為500S。
　　 2．魚藤根總黃酮的HPLC分析條件優(yōu)化
　　 魚藤根提物中主要含有魚藤酮和魚藤素，兩者性質(zhì)極為相似難以分離和檢測(cè)，本方法優(yōu)化改進(jìn)了魚藤

3、酮和魚藤素的HPLC檢測(cè)方法，流動(dòng)相改為乙腈和水，洗脫方式為梯度洗脫，色譜條件：waters SunFire C18色譜柱(250mm×4．6mm，5μ m)、流動(dòng)相為A(乙腈)和B(0．1％三氟乙酸)混合梯度洗脫：0—8minA(55％—65％)；8—11minA(65％—70％)；11—15minA(70％—90％)。流速為1mL/min、柱溫為25．0℃，進(jìn)樣量為10μL。此方法較之傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，有效避免了色譜峰的拖尾現(xiàn)象及兩種

4、物質(zhì)分離度低等問(wèn)題，可以精確測(cè)定魚藤素的含量及純度。
　　 3．HSCCC分離條件優(yōu)化
　　 提取浸膏中主要成分為魚藤素和魚藤酮兩者性質(zhì)極為相近，采用傳統(tǒng)分離手段很難將其分離獲得魚藤素，采用高速逆流色譜技術(shù)以正己烷．乙酸乙酯．甲醇．水(體積比為7：0．5：5：3)為兩相溶劑系統(tǒng)，在主機(jī)轉(zhuǎn)850r/rain、流速2．0mL/min、檢測(cè)波長(zhǎng)254nm條件下進(jìn)行分離制備，可制備純度在95％以上的魚藤素。本方法分離時(shí)間短，分離

5、量大，樣品無(wú)損失，溶劑回收率高。
　　 4．確定魚藤素穩(wěn)定性
　　 魚藤素魚藤素耐光性較差，故應(yīng)避光保存。魚藤素有較強(qiáng)的耐熱性及耐超聲波性，長(zhǎng)時(shí)間加熱及超聲處理均未使其結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。魚藤素具有良好的耐酸性，在堿性條件下魚藤素的分子結(jié)構(gòu)迅速發(fā)生改變。
　　 5．魚藤素還原條件優(yōu)化
　　 魚藤素可以被硼氫化鈉還原為羥基魚藤素，升高溫度有利于加速反應(yīng)進(jìn)程，在超聲波作用下反應(yīng)時(shí)間大大縮短，適當(dāng)增加超聲功率和減小超