α-硫辛酸對(duì)鎘致雌性大鼠生殖毒性作用的干預(yù)研究.pdf

1、目的：鎘是環(huán)境中廣泛存在的有毒重金屬之一，也是一種高度可疑的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì);主要經(jīng)消化道或呼吸道進(jìn)入動(dòng)物和人體內(nèi)，引起多種器官組織和細(xì)胞毒性損傷。其中對(duì)生殖系統(tǒng)的毒性較為敏感且影響深遠(yuǎn)，已受到國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者的普遍關(guān)注，并進(jìn)行了大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，但對(duì)鎘的雌性性腺生殖毒性的系統(tǒng)干預(yù)研究報(bào)道甚少。本文旨在探討a-硫辛酸對(duì)鎘致雌性大鼠生殖系統(tǒng)損害的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制，為鎘中毒的預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。 方法： 1、40只

2、雌性成年SD大鼠按體重隨機(jī)分為4組，每組10只，包括對(duì)照組、單純?nèi)炬k組、鎘+低劑量a-硫辛酸(Low-doseLA)、鎘+高劑量a-硫辛酸組(High-dose LA)。給3個(gè)實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射1.0mg/kg Cdcl<,2>溶液，每天1次，每周5天，連續(xù)6周；對(duì)照組大鼠在相應(yīng)時(shí)間腹腔注射等量生理鹽水；于第7周、第8周兩干預(yù)組大鼠分別腹腔注射20mg/kg、100mg/kga．硫辛酸溶液，對(duì)照組與單純?nèi)炬k組在相應(yīng)時(shí)間內(nèi)腹腔注射生理鹽水

3、，注射容量均為5ml/kg，每周5次。 2、染毒第20天起每12h用陰道脫落細(xì)胞涂片法連續(xù)觀察并記錄動(dòng)情周期。 3、干預(yù)結(jié)束后心臟取血制備血清，用放射免疫分析法(RIA)測(cè)定各組促卵泡生成激素(FSH)、黃體生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的含量。 4、剖腹取子宮、卵巢連同上述所得部分血清經(jīng)消化后用原子吸收光譜法測(cè)定鎘含量。 5、用二巰雙硝基苯甲酸法測(cè)定卵巢谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-P

4、x)活性；用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定卵巢超氧化物歧化酶(SOD)活性。 6、卵巢連續(xù)切片在電鏡下觀察其病理形態(tài)學(xué)改變。 7、使用SPSS12.0軟件中的卡方檢驗(yàn)、Q檢驗(yàn)、方差分析對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。 結(jié)果： 1、各組大鼠一般情況：?jiǎn)渭內(nèi)炬k組大鼠出現(xiàn)不同程度的精神委靡、食欲減退、被毛光澤度下降、腹瀉，解剖發(fā)現(xiàn)3只大鼠有不同程度的腹水和臟器粘連；a-硫辛酸干預(yù)組精神狀況、食欲與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異。 2

5、、大鼠動(dòng)情周期的觀察：與對(duì)照組相比，單純?nèi)炬k組大鼠動(dòng)情周期和動(dòng)情間期異常率(動(dòng)情周期和動(dòng)情間期延長(zhǎng))均明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與單純?nèi)炬k組相比，高、低劑量a-硫辛酸組動(dòng)情周期和動(dòng)情間期異常率有所下降，但差異不明顯(P>0.05)；其它動(dòng)情時(shí)期在各劑量組間無(wú)明顯差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3、血清性激素含量的測(cè)定：?jiǎn)渭內(nèi)炬k組血清中E<,2>、P含量較對(duì)照組明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與單純?nèi)炬k

6、組比，低劑量Q．硫辛酸組血清中P含量升高(P<0.05)，E<,2>含量有所升高但差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量a-硫辛酸組血清中E<,2>、P含量明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；血清中FSH、LH含量各劑量組間無(wú)明顯差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4、血清鎘含量的測(cè)定：與對(duì)照組比，單純?nèi)炬k組血清鎘含量明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與單純?nèi)炬k組比，低劑量a-硫辛酸組血清鎘含量下降(P<

7、0.05)，高劑量a-硫辛酸組血清鎘含量明顯下降(P<0.01)；且與對(duì)照組比，高劑量a-硫辛酸組血清鎘含量無(wú)明顯差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5、子宮鎘含量的測(cè)定：與對(duì)照組比，單純?nèi)炬k組子宮鎘含量明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與單純?nèi)炬k組比，低劑量a-硫辛酸組子宮鎘含量下降不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量a-硫辛酸組子宮鎘含量明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 6、卵巢鎘含量的測(cè)定

8、：與對(duì)照組比，單純?nèi)炬k組卵巢鎘含量明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與單純?nèi)炬k組比，低劑量a-硫辛酸組卵巢鎘含量下降(P<0.05)，高劑量a-硫辛酸組卵巢鎘含量明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 7、卵巢酶活性的測(cè)定：與對(duì)照組比，單純?nèi)炬k組GSH-Px、SOD活性明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與單純?nèi)炬k組比，低劑量a-硫辛酸組可使卵巢中SOD活性升高(P<0.05)，高劑量a-硫辛酸組可使卵巢中GSH-P

9、x、SOD活性明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 8、卵巢電鏡形態(tài)學(xué)觀察：與對(duì)照組相比，單純?nèi)炬k組初級(jí)卵泡內(nèi)有大量脂滴、少量空泡變，細(xì)胞核不規(guī)則、核仁消失，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、脫顆粒，線粒體水腫、嵴數(shù)量減少，部分嵴排列紊亂、甚至融合消失，部分膜融合消失等表現(xiàn)；高、低劑量a-硫辛酸組可使以上現(xiàn)象有所緩解。 結(jié)論： 1、本研究成功制作大鼠亞慢性鎘中毒模型，進(jìn)一步明確鎘對(duì)大鼠的雌性性腺生殖毒性。 2、a-硫辛

10、酸可使大鼠動(dòng)情周期和動(dòng)情間期異常率以及血清、子宮、卵巢中鎘含量下降；使血清中E<,2>、P水平及卵巢中SOD、GSH-Px酶活性升高，從而說(shuō)明a-硫辛酸對(duì)鎘致大鼠的雌性性腺生殖毒性有良好的保護(hù)作用。 3、a-硫辛酸拮抗鎘毒性的機(jī)制可能與增強(qiáng)機(jī)體抗氧化防御體系、促進(jìn)鎘的排出、減少鎘的蓄積以及提高卵巢組織的酶活性和促進(jìn)雌、孕激素的合成和分泌有關(guān)。 4、綜合分析本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，高、低劑量a-硫辛酸組對(duì)鎘致大鼠的雌性性腺生殖毒性