中藥有效成分KBA對白血病細(xì)胞抑制增殖和誘導(dǎo)分化的研究.pdf

1、白血病是我國十大高發(fā)惡性腫瘤之一，病情兇險(xiǎn)，預(yù)后差，化療仍是治療的主要方法，但化療的毒副反應(yīng)及其耐藥性仍是尚未解決的難題。誘導(dǎo)分化療法為白血病治療的新策略，如全反式維甲酸（ATRA）治療急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL），但現(xiàn)有的誘導(dǎo)分化劑種類有限，也存在不同程度的毒副反應(yīng)。中藥人參的主要活性成分是人參皂苷，國內(nèi)外對人參總皂苷及其各單體抗腫瘤的研究有很多報(bào)道，但人參皂苷抗白血病和誘導(dǎo)分化的研究很少。
　　目的：
　　從人參總皂苷

2、進(jìn)一步分離出多個(gè)組分，從中篩選出抗白血病活性最佳的人參皂苷KBA組分（暫命名），本文研究其抑制白血病克隆增殖及誘導(dǎo)分化的生物學(xué)活性，為今后的深入研究和臨床應(yīng)用提供客觀依據(jù)。
　　方法：
　　靶細(xì)胞為紅系K562、粒系HL-60和巨核系CHRF-288三個(gè)系列的白血病細(xì)胞，采用半固體集落培養(yǎng)法觀察不同濃度的KBA組分（5、10、20、50、75和100mg/L）抑制白血病細(xì)胞增殖的作用。并用較低濃度的KBA組分（5、20、50

3、mg/L）較長時(shí)間地處理上述細(xì)胞，試圖誘導(dǎo)原始細(xì)胞分化，通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)，聯(lián)苯胺染色、NBT還原試驗(yàn)及流式細(xì)胞術(shù)等方法，分析KBA組分誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化的生物學(xué)活性。
　　結(jié)果：
　　一．KBA組分有效地抑制白血病細(xì)胞增殖，呈劑量依賴性
　?。?）低劑量10、20mg/L對K562、HL-60和CHRF-288細(xì)胞集落的抑制率18.8±6.0％～32.6±6.8％（P分別<0.05和0.01）；
　?。?）中劑量5

4、0、75mg/L對三種白血病細(xì)胞集落的抑制率47.2±4.5％～78.9±4.3％（P均<0.01）；
　?。?）較高劑量100mg/L的抑制率達(dá)到92.7±7.9％～98.7±1.4％（P均<0.01）。
　　二．誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化的形態(tài)和功能變化
　?。?）經(jīng)KBA組分處理后，K562、HL-60細(xì)胞出現(xiàn)體積縮小，胞漿增多，胞核縮小，核/漿比例縮小，胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡的趨向；而CHRF-288細(xì)胞則體積增大，均與其分化

5、成熟相關(guān)。
　?。?）K562細(xì)胞經(jīng)聯(lián)苯胺染色后，陽性細(xì)胞率明顯增加，提示向紅系方向分化，細(xì)胞漿出現(xiàn)血紅蛋白。
　?。?）HL-60細(xì)胞NBT還原能力增強(qiáng)，表明向粒系成熟方向分化。
　　三．誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化抗原表達(dá)的陽性細(xì)胞率明顯增高
　?。?）K562細(xì)胞經(jīng)KBA組分誘導(dǎo)后，GPA、CD71陽性率81.0±6.9％、95.0±4.0％，對照組GPA、為74.4±10.7％、91.4±6.4％，
　?。?

6、）HL-60細(xì)胞對照組CD11b、CD15陽性率為1.5±0.3％、51.4±11.6％， KBA組分誘導(dǎo)后升高到2.7±1.1％、74.9±9.1％。
　　（3）CHRF-288細(xì)胞對照組CD61、CD42b陽性率為40.9±20.0％、20.8±7.7％， KBA組分誘導(dǎo)后升高到57.3±16.1％、28.1±12.2％。
　　結(jié)論：
　　自行提取的中藥有效成分KBA組分具有抗白血病的生物學(xué)活性，不但顯著地抑制紅系