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文檔簡介
1、第一部分:蛋白質(zhì)分離—雙向電泳實驗技術(shù)的建立與優(yōu)化目的:1.建立細胞和血清表達蛋白質(zhì)組研究中雙向凝膠電泳(Two-dimensional gel electrophoresis,2DE)技術(shù)分離蛋白質(zhì)的實驗方法與優(yōu)化條件.2.尋找2DE圖譜上乳腺癌細胞系與正常乳腺上皮細胞系之間以及原發(fā)性乳腺癌患者與健康對照者血清之間的差異表達蛋白點.結(jié)論:1.采用優(yōu)化后的雙向凝膠電泳技術(shù)條件能夠成功地進行乳腺癌蛋白質(zhì)組學(xué)研究中蛋白質(zhì)的分離.2.乳腺癌細
2、胞系T47D與正常乳腺上皮細胞系HBL-100之間2DE蛋白表達譜相似,二者之間存在蛋白質(zhì)表達差異.3.原發(fā)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者與健康對照者血清的2DE蛋白表達譜十分相似,不過二者之間的確存在差異表達蛋白點.第二部分:蛋白質(zhì)鑒定——質(zhì)譜分析與生物信息學(xué)研究目的:1.鑒定在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌細胞系T47D和正常乳腺上皮細胞系HBL-100以及在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者和健康對照者血清2DE圖譜中存在的差異蛋白質(zhì).2.對鑒定出的各個蛋白質(zhì)進行功能
3、查詢,進行與乳腺癌相關(guān)分析,推測它們在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機理.結(jié)論:1.成功建立了乳腺癌細胞系和血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法.2.乳腺癌細胞系T47D和正常乳腺細胞系HBL-100中存在特異的差異表達蛋白質(zhì),分別涉及能量相關(guān)的各種酶和抗氧化相關(guān)蛋白.進一步闡明了腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中既存在促進腫瘤生長的正向環(huán)境也存在對其清除抵抗的防御反應(yīng).從而為下一步尋找乳腺癌診斷和治療標(biāo)志物提供了參考依據(jù).3.乳腺癌患者和健康對照者血清中蛋白表達總體水平差
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