煤工塵肺鼠并發(fā)腦血管病的模型制備及血液流變學機制分析.pdf

1、實驗背景：煤工塵肺(Coal worker's pneumoeoniosis簡稱CWP)的概念最早于1942年由英國工業(yè)肺疾病委員會提出，是指煤礦各工種工人長期吸入生產環(huán)境中的粉塵，所引起肺部塵肺病變的總稱。近年在我國一些煤炭大省，隨著采煤生產機械化程度的提高，生產場所粉塵濃度隨之上升，在一些仍采用干式作業(yè)的礦井，或是一些防塵措施還不很到位的礦井，煤工塵肺的罹患率仍居高不下。近來有流行病學調查資料顯示，煤工塵肺的并發(fā)癥中除了肺結核、腫瘤

2、和肺心病等傳統(tǒng)并發(fā)癥以外，腦血管病的并發(fā)率正在日益上升。
　　 利用大鼠形成塵肺病的疾病模型國內已有不少先例，并且染塵發(fā)生的塵肺病變大部分在各方面和人都是很相似的。有成功先例的染塵方法大致有氣管內注入法、自然吸入法、腹腔注入法與皮下注入法等。其中相對具有實用價值的有氣管內注入法和自然吸入法兩種。但國內對于塵肺病變引起腦血管病的動物模型尚無先例報道，對于相關的發(fā)病機制也較少研究。
　　 大量資料表明：血液粘滯性增高可以影響

3、臟器微循環(huán)灌注，造成臟器組織缺血、缺氧、酸中毒、微循環(huán)障礙，高粘血癥是某些疾病如腦梗死、心肌梗死、冠心病、高血壓和肺心病等發(fā)生發(fā)展的重要因素，疾病與其所呈現的高粘血癥往往互為因果，造成惡性循環(huán)。從動物模型角度詳細揭示腦血管病發(fā)生發(fā)展過程中的血液流變學機制，可以為臨床腦血管病的預防及診治多辟一條途徑。
　　 實驗目的：通過實驗性煤工塵肺大鼠模型的制備，初步探討煤工塵肺并發(fā)腦血管病的血液流變學機制，擬為煤工塵肺并發(fā)腦血管病的預防提供

4、科研依據，同時也對臨床腦血管病發(fā)病過程中血液流變學因素的作用機制作一分析。
　　 實驗方法：用一定方法制備好無煙煤煤塵懸液，確保煤塵顆粒有95％以上粒徑小于5微米。將200-250g左右雄性wistar大鼠隨機分為四組，模型組和對照組各兩組，采用非暴露氣管內注入法將煤塵懸液一次性注入模型組大鼠氣管內，同時對照組注入等量生理鹽水。模型一組動物正常飼養(yǎng)，出現神經行為學癥狀后的大鼠視為發(fā)病，予以隔離組成腦血管病組，參照Zea Long

5、a評分方法對其進行神經功能學評分，采血并留取肺、腦組織標本；模型二組動物分別于第4、8、12、16、20W后各隨機處死6只并留取血及肺腦標本。實驗期滿后處死所有大鼠并如上留取相關標本。對留取血樣行動脈血氣分析、血清EPO含量測定及部分血液流變學指標測定。對肺腦組織標本經固定切片后予以形態(tài)學檢測。
　　 實驗結果：模型一組大鼠在整個實驗過程中累計發(fā)病11只，對照一組大鼠沒有出現任何神經行為學異常。兩組間評分差距有顯著的統(tǒng)計學意義。

6、模型二組、對照二組及腦血管病組三組間比較結果：三組大鼠在相同時間條件下兩兩之間血清EPO含量差別都有統(tǒng)計學意義，以腦血管病組EPO含量為最高。進一步分析模型二組和對照二組組內各不同時間點的血清EPO含量，發(fā)現對照組組內差別無統(tǒng)計學意義，而模型組內差別有統(tǒng)計學意義。造模4周后的模型鼠血清EPO含量較對照組明顯升高，以后隨著時間的延長逐漸有所下降，但仍高于對照組。同期比較三組大鼠之間PaO2差別均有顯著性意義，模型組要顯著低于對照組，但要高

7、于腦血管病組。同期比較三組大鼠之間全血粘度與HCT之間差別均有統(tǒng)計學意義，腦血管病組要顯著高于模型組和對照組。組內分析：隨著時間的延長，各組全血粘度均呈上升趨勢，尤其模型組間各時點間的差別有顯著性意義。形態(tài)學觀察結果：可見到模型組大鼠肺部有輕重不等的煤塵纖維灶及灶周肺氣腫，少數模型鼠有局灶性纖維化。模型組大鼠腦部有輕重不等的淡染的神經元減少甚至缺失區(qū)域，腦血管病組大鼠鏡下能見到大小不等的梗死灶，灶中神經元明顯減少，有些呈空泡狀，胞質染色