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文檔簡介
1、目的: 觀察血小板源生長因子-B(PDGF-B)在糖尿病大鼠心肌中的表達(dá)以及纈沙坦干預(yù)的影響,探討PDGF-B在糖尿病心肌病發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法: 第一部分8周齡雄性SD大鼠60只,隨機(jī)分為對(duì)照組30只,糖尿病組30只。鏈脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射建立糖尿病模型。每2周測量血糖、體重。在病程4周、8周、12周分別從兩組大鼠中隨機(jī)選擇6只,稱量并計(jì)算心體比(H/B)和左室重量指數(shù)(LVMI)。電鏡觀察比較
2、12周糖尿病組與對(duì)照組大鼠心肌超微結(jié)構(gòu),光鏡觀察比較兩組冠脈病變。RT-PCR,和免疫組化方法比較不同病程各組大鼠心肌PDGF-B、纖維連接蛋白(FN)、Ⅲ型膠原(ColⅢ)的mRNA和蛋白表達(dá)情況。 第二部分8周齡雄性SD大鼠32只,隨機(jī)分為對(duì)照組8只,糖尿病組24只(STZ腹腔注射誘導(dǎo)),成模后分為未治療組(蒸餾水灌胃)、纈沙坦小劑量治療組(10mg/kg/d)、纈沙坦大劑量治療組(30mg/kg/d)各8只。灌胃給藥每日一
3、次。灌胃給藥12周后處死各組大鼠,放免法測定血漿和心肌血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)濃度。采用天狼星紅染色及計(jì)算機(jī)圖像分析測量心肌間質(zhì)的膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)。各組其余實(shí)驗(yàn)方法同第一部分。 結(jié)果: 第一部分STZ誘導(dǎo)糖尿病SD大鼠在病程12周心肌超微結(jié)構(gòu)病變顯著,冠脈末見病變,糖尿病心肌病已形成。在病程4周、8周、12周,糖尿病組H/B、LVMI逐漸增加,心肌PDGF-B mRNA和蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.01),隨著病程延
4、長,呈逐漸增高趨勢,與FN、ColⅢ表達(dá)進(jìn)行性增高相平行。PDGF-B與FN、ColⅢmRNA表達(dá)呈明顯正相關(guān)(r=0.766,0.794,均P<0.01)。 第二部分在糖尿病SD大鼠,纈沙坦干預(yù)治療12周后,血漿和心肌AngⅡ濃度升高;糖尿病心肌超微結(jié)構(gòu)的病理變化改善;H/B、LVMI降低(P<0.05~0.01),糖尿病心肌中FN、ColⅢ的表達(dá)減少,心肌間質(zhì)CVF降低(均P<0.01);PDGF-B mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào)
5、,大小劑量治療組分別減少糖尿病心肌PDGF-BmRNA的表達(dá)56%與27%(P<0.01)。以上效應(yīng)具有劑量依賴性。 結(jié)論: 1、STZ誘導(dǎo)的糖尿病SD大鼠病程12周,糖尿病心肌病己形成。 2、糖尿病大鼠心肌PDGF-B表達(dá)上調(diào)與細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的積聚密切相關(guān),在糖尿病心肌纖維化病變中起重要作用,有望成為一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。 3、纈沙坦干預(yù)能減少ECM積聚,減輕心肌纖維化,改善心肌結(jié)構(gòu)。 4、P
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