C-myc反義寡核苷酸對(duì)重新表達(dá)FHIT基因的結(jié)腸癌細(xì)胞增殖及凋亡作用的影響.pdf

1、目的：癌癥是一種多因素、多階段、多基因變異累積的復(fù)雜病變過(guò)程。大多數(shù)的致癌因素主要通過(guò)影響遺傳基因而發(fā)揮其作用，主要表現(xiàn)為癌基因的過(guò)度表達(dá)和抑癌基因的表達(dá)缺失。本研究主要是觀察脂質(zhì)體介導(dǎo)的c-myc反義寡核苷酸對(duì)表達(dá)FHIT基因的結(jié)腸癌細(xì)胞增殖及凋亡作用的影響，以確定多基因干預(yù)在治療治療中可能發(fā)揮的作用。 方法：用脂質(zhì)體法將重組FHIT基因PRC/CMV質(zhì)粒和空載體轉(zhuǎn)染到人類結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480，并分別轉(zhuǎn)染c-myc反義寡核苷

2、酸，用western blot法檢測(cè)細(xì)胞FHIT和c-myc的表達(dá)，用MTT法分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，用AO/EB染色法和流式細(xì)胞分析技術(shù)測(cè)細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：轉(zhuǎn)染FHIT基因后，SW480（FHIT+ SW480）細(xì)胞有明顯的FHIT蛋白的表達(dá)，而轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞（FHIT- SW480）未檢測(cè)到FHIT蛋白的表達(dá)。而轉(zhuǎn)染c-myc反義寡核苷酸后，對(duì)SW480細(xì)胞c-myc的表達(dá)有明顯的抑制作用，并呈明顯的時(shí)間依賴性（p<0.01）。

3、C-myc反義寡核苷酸對(duì)FHIT+/- SW480細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用（p<0.01），但對(duì)于FHIT+ SW480細(xì)胞的抑制作用明顯強(qiáng)于FHIT- SW480細(xì)胞（p<0.01）。同時(shí)，c-myc反義寡核苷酸對(duì)FHIT+/- SW480細(xì)胞的凋亡均有明顯的促進(jìn)作用，但對(duì)FHIT+ SW480細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用明顯的強(qiáng)于FHIT- SW480細(xì)胞（p<0.01）。 結(jié)論：FHIT基因在SW480細(xì)胞中表達(dá)，本身不能促進(jìn)細(xì)