補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其拆方大鼠血清抑制食管癌EC9706細(xì)胞EGFR-PLC-γ1-PKCα信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究.pdf

1、河南中醫(yī)學(xué)院2007屆碩士研究生學(xué)位論文補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其拆方大鼠血清抑制食管癌EC9706細(xì)胞EGFR—PLC—Y卜PKCQ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究研究生姓名：導(dǎo)師：學(xué)科、專(zhuān)業(yè)：所屬院、系：黃志良司富春教授中醫(yī)基礎(chǔ)理論基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院中國(guó)鄭州2007年4月30日摘要摘要目的：通過(guò)觀察補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其補(bǔ)氣、祛濕化痰拆方大鼠血清對(duì)人食管癌EC9706細(xì)胞的增殖抑制作用和對(duì)EGFR—PLC11一PKCa信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，探討補(bǔ)氣運(yùn)脾湯治療食管癌的分子機(jī)理，闡明

2、食管癌中醫(yī)病機(jī)的部分內(nèi)涵。方法：采用人食管癌細(xì)胞EC9706為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，用補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其補(bǔ)氣、祛濕化痰拆方大鼠血清處理細(xì)胞，在倒置顯微鏡下觀察EC9706細(xì)胞形態(tài)的改變；用MTT法檢測(cè)對(duì)EC9706細(xì)胞生長(zhǎng)的影響；用westernblot檢測(cè)EC9706細(xì)胞EGFR、PLC，yl、PKCa蛋白表達(dá)水平和蛋白酪氨酸磷酸化水平。結(jié)果：l補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其祛濕化痰拆方大鼠血清對(duì)Ec9706細(xì)胞增殖有抑制作用，補(bǔ)氣組大鼠血清細(xì)胞形態(tài)與對(duì)照組相似，顯

3、示出很弱的抑制作用。表明補(bǔ)氣藥物與祛濕化痰藥物對(duì)抑制食管癌細(xì)胞增殖有協(xié)同增效作用。2量效關(guān)系實(shí)驗(yàn)顯示全方組、補(bǔ)氣組和祛濕化痰組大鼠血清濃度在10％時(shí)對(duì)食管癌細(xì)胞增殖抑制率最高，而隨著血清濃度的增加抑制率均有所下降。3在人食管癌EC9706細(xì)胞可檢測(cè)到較高的EGFR、PLC—Y1、PKC理蛋白分子表達(dá)。補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其拆方大鼠血清能夠不同程度地抑制EGFRPLCY1PKCd信號(hào)通路各蛋白表達(dá)水平，以全方組作用最強(qiáng)，祛濕化痰組次之。結(jié)論：1補(bǔ)

4、氣運(yùn)脾湯及其拆方大鼠血清在一定濃度下均能抑制人食管癌細(xì)胞EC9706的生長(zhǎng)，以全方效果最好。2補(bǔ)氣運(yùn)脾湯的兩個(gè)拆方補(bǔ)氣方和祛濕化痰方對(duì)抑制食管癌細(xì)胞增殖有協(xié)同增效作用。3補(bǔ)氣運(yùn)脾湯及其拆方大鼠血清可能通過(guò)抑制EC9706細(xì)胞EGFR—PLCT卜PKCn信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中各信號(hào)蛋白表達(dá)而抑制食管癌細(xì)胞增殖。4以方測(cè)證，在食管癌病變中，氣虛、痰濕與EGFR—PLcT1PKca通路中各信號(hào)分予表達(dá)和轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)有關(guān)。關(guān)鍵詞：補(bǔ)氣運(yùn)脾湯補(bǔ)氣祛濕化痰人食