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1、本研究以含有重要生理活性物質(zhì)的銀杏葉為研究對(duì)象,采用微波輔助提取法和超聲波輔助提取法,通過正交實(shí)驗(yàn)研究銀杏活性成分的外場(chǎng)強(qiáng)化提取優(yōu)化工藝;利用光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡微觀表征技術(shù),分別從微觀角度、動(dòng)力學(xué)角度考察了銀杏葉在外場(chǎng)強(qiáng)化提取過程中的微觀結(jié)構(gòu)變化及動(dòng)力學(xué)行為特征,深入分析外場(chǎng)強(qiáng)化傳質(zhì)機(jī)理;利用溶劑萃取、大孔樹脂吸附分離方法,比較研究不同分離方法對(duì)不同外場(chǎng)作用下銀杏提取物抗氧化活性的影響。具體內(nèi)容及結(jié)果如下:
1.分別利用
2、溶劑回流提取法、微波輔助提取法、超聲波輔助提取法提取銀杏黃酮,設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了三種方法提取銀杏黃酮的最佳工藝條件,其提取時(shí)間分別為180 min、15 min、40 min,料液比分別為1:40、1:25、1:20(g:mL),提取溫度分別為80℃、70℃、50℃,乙醇體積分?jǐn)?shù)均為80%;在各自的優(yōu)化提取工藝條件下,三種方法所得銀杏黃酮得率分別為3.10%、4.09%和3.68%。
2.運(yùn)用光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡表征技術(shù),
3、從微觀角度研究溶劑回流、微波、超聲波在銀杏葉有效成分提取過程中的破壁和強(qiáng)化傳質(zhì)機(jī)理。通過對(duì)銀杏葉細(xì)胞的微觀結(jié)構(gòu)變化比較分析可知,不同提取方法、不同提取時(shí)間對(duì)植物細(xì)胞組織的影響程度明顯不同;微波和超聲波兩種外場(chǎng)使細(xì)胞壁更易出現(xiàn)裂縫,細(xì)胞更易破碎,并且隨著外場(chǎng)處理時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞受損更加明顯;兩種外場(chǎng)作用均有利于細(xì)胞內(nèi)容物的溶出,提高產(chǎn)物得率。
3.選取提取溫度、乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比三個(gè)影響因素,考察了在不同外場(chǎng)條件下銀杏黃酮
4、提取過程的動(dòng)力學(xué)特性。
采用微波提取時(shí),得率-時(shí)間關(guān)系和ln[C∞/(C∞-C)]-t關(guān)系均表明:在提取的初始階段,銀杏黃酮得率能在較短時(shí)間內(nèi)迅速提高,提取過程符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程反應(yīng)特征。對(duì)于銀杏黃酮的微波提取,在初期適當(dāng)提高溫度、增加溶劑濃度將利于目標(biāo)產(chǎn)物的溶出。
采用超聲波提取時(shí),得率.時(shí)間關(guān)系和ln[C∞/(C∞-C)]-t關(guān)系均表明:在提取初期銀杏黃酮得率上升較緩慢,提取過程符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程反應(yīng)特征
5、。對(duì)于銀杏黃酮的超聲波提取,可以在較低溫度、較低料液比的條件下通過適當(dāng)提高乙醇濃度而達(dá)到較好的提取效果。
4.利用溶劑萃取、大孔樹脂吸附分離方法比較研究不同分離方法對(duì)銀杏提取物抗氧化活性的影響。大孔樹脂吸附分離產(chǎn)物比溶劑萃取分離產(chǎn)物抗氧化性更強(qiáng);超聲波輔助提取法銀杏提取物的抗氧化能力略高于微波輔助提取法提取物;
采用溶劑萃取分離法時(shí),清除DPPH自由基能力最強(qiáng)的是乙酸乙酯萃余物,其IC50值為1.44μg/m
6、L(微波法)、1.23μg/mL(超聲波法);清除羥基自由基能力最強(qiáng)的是乙酸乙酯萃余物,其IC50值為5.42μg/mL(微波法)、5.47μg/mL(超聲波法);清除超氧陰離子自由基能力最強(qiáng)的是石油醚萃余物,其IC50值為1.08μg/mL(微波法)、1.10μg/mL(超聲波法)。
采用大孔樹脂吸附分離法時(shí),清除DPPH自由基能力最強(qiáng)的是30%洗脫液清除,其IC50值為1.65μg/mL(微波法)、1.47μg/mL(
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