基于抑制性因子作用探討三物白散抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)機制.pdf

1、目前研究表明機體的免疫狀態(tài)是決定著腫瘤發(fā)展、轉(zhuǎn)移的主要因素，所以機體抗腫瘤免疫的病理生理機制越來越受關(guān)注。如果把腫瘤看成為“邪”的范疇，那機體的免疫狀態(tài)就是“正”的范疇，這與中醫(yī)學(xué)“邪正”理論密切相關(guān)。隨著對腫瘤病理生理逐步深入的研究，“邪正”的內(nèi)涵也隨之有了新的認(rèn)識。而祛邪法作為針對這些邪氣的治療方法，在抗腫瘤過程中的作用機制也隨之不斷被闡述，在臨床也因此被不斷廣泛運用。
　　 由于細(xì)胞因子參與抗腫瘤免疫的各個環(huán)節(jié)，并起著十分

2、重要的作用。因此不同細(xì)胞因子介導(dǎo)的機體免疫狀態(tài)及其介導(dǎo)的機制成為了研究的熱點。
　　 其中抑制性細(xì)胞因子在腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移過程扮演著重要的角色，主要以IL-4、IL-6、IL-10等Th2型細(xì)胞因子以及轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)以及前列腺素E2(PGE2)為代表。目前研究證實這類因子可誘導(dǎo)機體處于免疫抑制狀態(tài)從而促進腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移，屬于中醫(yī)“邪”的范疇。
　　 基于上述認(rèn)識，本實驗在前期研究證實三物白散可通過逆轉(zhuǎn)Th1/

3、Th2型細(xì)胞因子、降低VEGF表達(dá)、促進巨噬細(xì)胞分泌Th1型細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α而降低抑制性因子IL-6的分泌以實現(xiàn)免疫正相調(diào)節(jié)作用的基礎(chǔ)上，進一步探討該方在抗腫瘤過程中能否通過影響TGF-β以及PGE2的分泌而達(dá)到免疫調(diào)節(jié)作用。
　　 實驗研究部分首先對三物白散制備工藝進行改進，主要是巴豆霜的制備。再從整體水平研究巴豆油含量不同的三物白散的抗腫瘤效應(yīng)。分別制備巴豆霜含油量為5％、10％、20％的三物白散(以下簡稱5％

4、、10％、20％藥物組)進行抗腫瘤效用研究并用CTX組進行對照。結(jié)果表明陽性對照組和巴豆油含量不同的三物白散皆有明顯的抗腫瘤效應(yīng)，其中以巴豆霜含油量為10％藥物組抗腫瘤功效最佳，胸腺及脾臟指數(shù)表明其能明顯改善機體的免疫狀態(tài)。并用ELISA方法對正常組及各組血清中TGF-β1以及PGE2含量進行檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，模型組的TGF-β1顯著高于正常組，表明荷瘤體確實存在免于抑制狀態(tài)，藥物組TGF-B1以及PGE2含量與模型組和陽性對照組相比，皆

5、不同程度降低，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義，表明三物白散可通過影響荷瘤鼠體內(nèi)TGF-β1、PGE2的分泌來調(diào)節(jié)免疫，且仍以10％藥物組效果最好。
　　 再用整體水平抗腫瘤效應(yīng)較好的5％、10％藥物組進行體外研究。藥物等比稀釋成不同濃度干預(yù)腫瘤細(xì)胞，結(jié)果表明新法制備的三物白散在體外同樣具有明顯的抑瘤效應(yīng)，并與藥物濃度呈正相關(guān)，且10％優(yōu)于5％藥物組。對藥物作用后上清中TGF-β1、PGE2的含量進行檢測，結(jié)果同樣表明三物白散可減少兩者的產(chǎn)生