PDTC對乙炔雌二醇誘導孕鼠膽汁淤積肝臟Bsep-Ntcp表達的影響及分子機制.pdf

1、目的:通過給孕鼠注射17-β-乙炔雌二醇(17-beta-ethinylestradiol，EE)建立妊娠肝內膽汁淤積癥(intrahepatic cholestasis ofpregnancy，ICP)模型，檢測孕鼠肝組織核因子kB(nuclear kappaB，NF-kB)p65的表達水平，并探討NF-kB特異性抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)對NF-kB信號通路的膽鹽

2、輸出泵(bile salt export pump，Bsep)、鈉-?；悄懰猁}共轉運多肽(Na+-taurocholatecotransporting polypeptide，Ntcp)蛋白表達水平的影響及可能機制。
　　 方法:選用50只雌性SD孕鼠作為研究對象，(1)、妊娠第15天起隨機分為5組孕鼠，包括正常妊娠對照組、模型組、高劑量治療組、低劑量治療組和PDTC對照組各10只，每組處理如下:正常妊娠對照組為頸后皮下及腹腔分

3、別注射2.5ml.kg1.d-1和2.5ml.kg-1.d-11，2-丙二醇（溶劑）;模型組為頸后皮下注射EE2.5ml.kg-1.d-1;高劑量治療組為頸后皮下注射EE2.5ml.kg1.d1及腹腔注射100mg.kg-1.d-1 PDTC;低劑量治療組為:頸后皮下注射EE2.5ml.kg-1.d-1及腹腔注射50mg.kg-1.d-1PDTC; PDTC對照組為頸后皮下注射2.5ml.kg-1.d-11，2-丙二醇及腹腔注射100m

4、g.kg-1.d-1 PDTC;連續(xù)注射共5天，于妊娠第20天處死所有大鼠。(2)、5組孕鼠均用藥后采血檢測血清中總膽酸(totaI bile acid，TBA)、谷丙轉氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、谷草轉氨酶（aspartate aminotransferase，AST）水平;取組織甲醛固定， HE染色觀察肝組織病理學變化，免疫組化測肝組織中NF-kB p65的表達水平;Westem Blot測鼠肝

5、組織中Bsep及Ntcp蛋白表達水平。
　　 結果:①通過孕鼠TBA、ALT、AST血清檢查和HE染色觀察，均顯示成功構建了孕鼠肝內膽汁淤積模型;②模型組孕鼠各項血清指標均增高，與正常妊娠對照組相比較，TBA、ALT、AST增加均有差異(p＜0.05);③PDTC處理阻斷NF-kB高劑量治療組與模型組比較，TBA、ALT、AST均降低(p＜0.05);④與正常妊娠對照組的肝臟比較，模型組顯示出明顯的形態(tài)學改變、炎癥反應重，肝臟結

6、構紊亂，而高劑量組、低劑量組較模型組好轉;⑤免疫組化檢測胞核中NF-kB p65表達，模型組較正常妊娠對照組及高劑量治療組提高，有統(tǒng)計學差異(p＜0.05);⑥Westem Blot檢測肝臟組織Bsep、Ntcp蛋白表達，與模型組比較，正常妊娠對照組、高劑量治療組表達均升高，均有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　 結論:1.本研究結果提示用雌激素構建的SD大鼠肝內膽汁淤積模型，可能涉及NF-kB信號通路、也許通過下調Bsep/N