LPS誘導動物膽汁淤積模型的制備及微管蛋白對BSEP功能影響的研究.pdf

1、目的：通過紫杉醇大鼠腹內給藥以探討微管蛋白對BSEP表達及分泌轉運功能的影響；LPS腹腔注入法制備成年大鼠膽汁淤積性肝病模型以研究BSEP表達與膽汁淤積性疾病之間的關系。 方法：用大腸桿菌脂多糖(LPS)腹腔注入法制備成年大鼠膽汁淤積性肝病模型，紫杉醇腹腔注入給藥，腹內注入等量生理鹽水設為對照。將大鼠隨機分為9組，生理鹽水對照組，LPS注入組及紫杉醇注入后8h組，48h組，1w組，各組n=5。所有動物于存活設定時間處死，抽取血清

2、送檢血清堿性磷酸酶、膽汁酸及總膽紅素水平以了解膽汁淤積程度；肝臟冰凍切片于共聚焦激光掃描熒光顯微鏡下觀察肝細胞膽管膜側BSEP表達情況。 結果：血清酶學檢測發(fā)現LPS注入組其血清堿性磷酸酶活性、膽汁酸及總膽紅素值均較同一時間生理鹽水對照組明顯增高，共聚焦熒光圖片發(fā)現LPS注入后肝細胞毛細膽管膜附近BSEP蛋白成像較生理鹽水組模糊，膽管結構欠清甚至部分缺失。而紫杉醇注入組血清堿性磷酸酶活性、膽汁酸及總膽紅素值亦較單純生理鹽水組增加

3、，可見膽汁淤積。共焦熒光圖片結果顯示，毛細膽管膜側BSEP蛋白較同一時間生理鹽水組成像模糊、變淡，可見缺失膽管結構。 結論：大腸桿菌脂多糖LPS腹內注入大鼠后可引起明顯的膽汁淤積，共焦圖象發(fā)現肝細胞毛細膽管膜側BSEP表達明顯減少，故認為BSEP表達減少或功能異常與膽汁淤積性疾病間關系密切；紫杉醇作為一種微管穩(wěn)定劑，雖可促進微管蛋白裝配成微管，但抑制微管的解聚，從而影響了微管的正常功能，導致肝細胞毛細膽管膜側BSEP蛋白表達及其