中獸藥丹連花子宮灌注液的安全性評價.pdf

1、奶牛子宮內(nèi)膜炎是危害性較大的繁殖性疾病，主要由病原菌感染引起。丹連花子宮灌注液由黃連、連翹、丹參和紅花等組成，具有清熱燥濕、活血化瘀的作用，對急性子宮內(nèi)膜炎具有顯著治療效果。臨床前毒理學(xué)研究是臨床用藥安全性和有效性的前提和基礎(chǔ)，本試驗(yàn)對丹連花子宮灌注液進(jìn)行了急性毒理學(xué)試驗(yàn)、亞慢性毒性試驗(yàn)和靶動物安全性試驗(yàn)研究，取得以下結(jié)果:
　　(1)丹連花子宮灌注液的急性毒理學(xué)試驗(yàn)
　　半數(shù)致死量(LD50)的測定:采用8只小鼠，雌雄各半

2、，隨機(jī)分為2組，擬定高劑量組給藥劑量5000 mg/kg體重，分別經(jīng)口灌服和腹腔注射丹連花子宮灌注液進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，并將每組小鼠數(shù)量增至10只，重復(fù)2次。結(jié)果表明，試驗(yàn)小鼠均未出現(xiàn)死亡，確定丹連花子宮灌注液對小鼠的經(jīng)口和腹腔注射LD50大于5000 mg/kg體重。
　　最大耐受量試驗(yàn):小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為2組，分別以給藥容積0.4 mL/10g體重經(jīng)口1次灌服濃度2.33 g生藥/mL的丹連花子宮灌注液，及以給藥容積0.2

3、 mL/10g體重1次腹腔注射濃度1 g生藥/mL的丹連花子宮灌注液，連續(xù)觀察10d，記錄小鼠的精神狀態(tài)、采食及飲水、被毛色澤及糞便性狀等。在試驗(yàn)第7天時，各試驗(yàn)小鼠稱重1次，并計算最大耐受倍數(shù)。結(jié)果表明，丹連花子宮灌注液經(jīng)口灌服和腹腔注射均未出現(xiàn)死亡，小鼠經(jīng)口和腹腔注射最大耐受量分別為93200 mg生藥/kg體重和20000mg生藥/kg體重，最大耐受倍數(shù)分別為466倍和100倍。
　　皮膚刺激性試驗(yàn):家兔16只，雌雄各半，隨

4、機(jī)分為4組，即完整皮膚組（2組，分單次和多次給藥組）和破損皮膚組（2組，分單次和多次給藥組）。采用自身對照法，分別考察丹連花子宮灌注液對完整皮膚和破損皮膚的影響。單次給藥組給藥6h后，用溫水將殘留藥物洗掉，多次給藥組每天給藥1次，連續(xù)7d。去除藥物后，觀察動物脫毛皮膚紅斑、水腫程度，是否有色素沉著、出血點(diǎn)、皮膚粗糙程度等情況。結(jié)果表明，各組試驗(yàn)家兔皮膚刺激性反應(yīng)評分均為0，刺激性強(qiáng)度評價為無刺激性。
　　陰道黏膜刺激性試驗(yàn):采用健

5、康雌性家兔6只，隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對照組。試驗(yàn)組用注射器緩慢子宮灌注丹連花子宮灌注液2 mL/只;對照組同法灌注等量生理鹽水。給藥后24 h，采用氣栓法處死動物，取出完整陰道，縱向切開，肉眼觀察陰道上、中、下3個部位是否有充血、水腫等表現(xiàn)，并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明，眼觀充血和水腫反應(yīng)評分分別為0.78分和0.33分，眼觀刺激強(qiáng)度評價為無刺激性;陰道黏膜組織病理反應(yīng)評分為1.67分，刺激指數(shù)0.67分，組織病理反應(yīng)刺激強(qiáng)度屬于無刺激性

6、。
　　(2)丹連花子宮灌注液的亞慢性毒性試驗(yàn)
　　SD大鼠80只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，其中高劑量組20 g生藥/kg體重（原藥液濃縮至2 g生藥/mL），中劑量組6.32 g/kg體重（原藥液加5％吐溫-80稀釋至0.632 g生藥/mL），低劑量組2g/kg體重（原藥液稀釋至0.2g生藥/mL），對照組按10 mL/kg體重灌胃溶劑溶液（5％吐溫-80溶液）。給藥容積均為1 mL/100g體重，每天給藥1次，連續(xù)30

7、d，所有大鼠自由采食和飲水，并記錄每天的體重、采食量、飲水量及臨床癥狀。試驗(yàn)結(jié)束后，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查、血液學(xué)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)檢測，計算主要臟器指數(shù)。結(jié)果表明，試驗(yàn)大鼠給藥期間精神狀態(tài)、行為、活動、被毛和糞便性狀，均未見異常變化;各試驗(yàn)組大鼠體重、臟器指數(shù)、血液學(xué)指標(biāo)及血液生化指標(biāo)與對照組同性別比較，差異不顯著(P＞0.05);高劑量組大鼠臟器組織未見明顯病理變化。說明丹連花子宮灌注液不同劑量較長時間使用較安全。
　　(3)丹連

8、花子宮灌注液的靶動物安全性試驗(yàn)
　　健康奶牛20頭，隨機(jī)分為4組，分別為1倍、3倍、5倍擬推薦劑量組和對照組。試驗(yàn)期7d，藥物組第2，4，6天子宮灌注給藥，給藥劑量分別為100，300，500 mL/d，在試驗(yàn)第1天和試驗(yàn)第7天時進(jìn)行臨床檢查、血液學(xué)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)檢測及組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明，試驗(yàn)牛給藥期間精神狀態(tài)、行為、活動、被毛和糞便性狀，均未見異常變化;給藥前后血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)與對照組比較，差異不顯著（P＞0.