高濃度大蒜油注射液的制備及安全性初步評價.pdf

1、大蒜為百合科蔥屬植物生蒜Allium sativum L.的鱗莖，大蒜油是粉碎后的大蒜泥經(jīng)水蒸一餾或有機溶劑萃取而得到的揮發(fā)油。大蒜油具有抗菌消炎，防癌抗癌，預(yù)防與治療心血管疾病，保護肝臟，提高機體免疫力以及抗衰老等功效。目前，國內(nèi)外報道有關(guān)大蒜的制劑主要有美國的大蒜油膠丸、日本的大蒜錠，德國和匈牙利的大蒜油β-環(huán)糊精包結(jié)的糖衣小丸，還有脫水大蒜粉、大蒜片，我國的大蒜油軟膠囊、大蒜油微膠囊、大蒜素(DATS，二烯丙基三硫醚)注射液和大蒜

2、油亞微乳。其中DATS為人工合成的單一成分，所制備的注射液分別于2004年及2005年從地方標(biāo)準(zhǔn)升為國家標(biāo)準(zhǔn)：大蒜油亞微乳注射液，雖然其研究已有成效，但離生產(chǎn)及應(yīng)用相距甚遠。 由于大蒜油難溶于水，在現(xiàn)有制劑中以粉劑、丸劑、片劑、膠囊劑為主，在很大程度上局限了給藥途徑。為了取得快速而穩(wěn)定的療效，臨床上常常希望將大蒜油制成注射液肌內(nèi)注射或靜脈注射給藥。傳統(tǒng)的大蒜油注射液常用吐溫-80增溶，而近年來吐溫-80的溶血反應(yīng)時有發(fā)現(xiàn)而被限用

3、或禁用。本文選用羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)包合大蒜油制備注射液，旨在提高大蒜油注射液中大蒜油濃度，提高大蒜油的穩(wěn)定性，降低大蒜油的刺激性及毒副作用，為臨床提供安全高效的高濃度大蒜油注射液。主要研究內(nèi)容如下： 高濃度大蒜油注射液中大蒜油含量測定方法的建立：HPLC法。采用Hypersil BDS-C18(200×0.46 mm，5μm，大連依立特)色譜柱，流動相為乙腈-水(62：38，v/v)，柱溫35℃，流速1.2 m

4、L/min，紫外檢測器，檢測波長220 nm。該方法檢測樣品在1.4929～0.0149 mg/mL范圍內(nèi)線性良好，精密度、回收率和重復(fù)性均符合相關(guān)規(guī)定。 高濃度大蒜油注射液的制備及穩(wěn)定性初步評價：通過正交試驗，對高濃度大蒜油注射液的制備工藝進行了篩選，確定了研磨法及制備工藝最佳條件：大蒜油與環(huán)糊精的用量比為1： 10，研磨時間為1.5 h，制備溫度為30℃，pH值為8.5，所制備的高濃度大蒜油注射液外觀性狀呈淡黃色至黃

5、色澄明液體，pH值為8.5，規(guī)格為1 mL勝射液含大蒜油30.0 mg。高濃度大蒜油注射液穩(wěn)定性考察：以初勻速法設(shè)計，HPLC測定注射液中大蒜油含量，其有效期為1.78年，基本可以滿足臨床應(yīng)用需要；高濃度大蒜油注射液對光熱敏感，故應(yīng)在適宜溫度下避光貯存：加速試驗及長期留樣試驗6個月后表明，高濃度大蒜油注射液的性狀、pH值、含量等指標(biāo)未發(fā)生明顯變化。高濃度大蒜油注射液安全性初步評價：采用改良Karber法測定小鼠LD50；以劑量遞增法測定

6、小鼠蓄積性和耐受性；分別以劑量181、73、36 mg/Kg為3個試驗組，設(shè)陰性和陽性對照組進行小鼠骨髓微核試驗；分別以劑量250、125、63 mg/Kg為3個劑量組，設(shè)陰性和陽性對照組進行小鼠精子畸形試驗；用2％紅細胞混懸液進行溶血性試驗；肌內(nèi)注射高濃度大蒜油注射液后進行病理切片，觀察其刺激性。結(jié)果表明，小鼠肌內(nèi)注射高濃度大蒜油注射液，LD50為362.5mg/kg(以大蒜油計)，其95％可信限范圍為314.3～418.0mg/kg