COPD大鼠骨骼肌組織泛素系統(tǒng)基因及蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、背景: 體重減輕、營(yíng)養(yǎng)異常和骨骼肌功能不良是慢性阻塞性肺疾?。–OPD）廣為認(rèn)識(shí)的肺外效應(yīng)。COPD合并營(yíng)養(yǎng)不良的發(fā)生率很高，營(yíng)養(yǎng)不良可使患者骨骼肌和膈肌萎縮。目前認(rèn)為營(yíng)養(yǎng)不良其問(wèn)題本質(zhì)在于蛋白質(zhì)的降解加速，已知的蛋白降解途徑主要包括溶酶體途徑、泛素－蛋白酶體途徑和Ca2+依賴性途徑，其中，泛素－蛋白酶體途徑在多種蛋白質(zhì)的降解過(guò)程中發(fā)揮重要作用。 目的: 本項(xiàng)研究探討COPD大鼠骨骼肌中泛素-蛋白酶體系統(tǒng)基因及蛋

2、白表達(dá)的變化，從分子生物學(xué)水平闡明COPD骨骼肌蛋白降解機(jī)制。 方法: 制作COPD大鼠模型，設(shè)對(duì)照組。開胸在麻醉狀態(tài)下經(jīng)心臟抽血致死，15分鐘內(nèi)分離膈肌和雙側(cè)伸趾長(zhǎng)肌置組織管液氮內(nèi)凍存，并制備肺組織病理切片。利用RT-PCR技術(shù)，測(cè)定大鼠伸趾長(zhǎng)肌內(nèi)泛素、E2-14k的mRNA表達(dá)和膈肌內(nèi)泛素、蛋白酶體C2亞基的mRNA表達(dá)。用Western blot方法測(cè)定大鼠伸趾長(zhǎng)肌中蛋白酶體C2亞基蛋白水平的表達(dá)和膈肌內(nèi)E2-14

3、k、蛋白酶體C8亞基的蛋白表達(dá)。 結(jié)果: RT-PCR分析結(jié)果顯示，伸趾長(zhǎng)肌組織中泛素、E2-14k的mRNA表達(dá)（IOD值）較對(duì)照組增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）；膈肌組織中泛素的mRNA表達(dá)（IOD值）較對(duì)照組增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），蛋白酶體C2亞基的mRNA表達(dá)與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異（P>0.05）。Western blot分析結(jié)果顯示，伸趾長(zhǎng)肌組織中蛋白酶體C2亞基蛋白的表達(dá)較對(duì)照組增強(qiáng)