鹽酸氨溴索和地塞米松聯(lián)合應(yīng)用促進(jìn)人胎肺Ⅱ型上皮細(xì)胞成熟的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、早產(chǎn)兒發(fā)生新生兒呼吸窘迫綜合征(NRDS)將嚴(yán)重威脅新生兒生命，其主要原因是新生兒肺發(fā)育不成熟，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞不能合成足夠的肺表面活性物質(zhì)(PS)。地塞米松(DEX)被廣泛應(yīng)用于臨床，能夠有效促進(jìn)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞合成、分泌肺表面活性物質(zhì)，誘導(dǎo)胎肺成熟，但其孕周依賴性以及抑制胎兒生長和加重母胎感染等副作用已越來越多地引起關(guān)注。 鹽酸氨溴索(ABX)作為一種快速促排痰藥，除了能促進(jìn)呼吸道粘稠分泌物排出外，近年來大量研究表明還可促進(jìn)

2、表面活性物質(zhì)的合成和分泌，增加卵磷脂/鞘磷脂比值，也有明顯的促胎肺成熟作用，且與地塞米松相比無明顯不良反應(yīng)。 本實(shí)驗(yàn)擬聯(lián)合應(yīng)用鹽酸氨溴索與地塞米松作用體外培養(yǎng)的人胎肺Ⅱ型上皮細(xì)胞，并與單一應(yīng)用鹽酸氨溴索或地塞米松組相比較，確定鹽酸氨溴索與地塞米松在體外促胎肺成熟方面是否具有協(xié)同作用。 材料與方法: 1、材料來源 選擇2006年4月至2006年12月期間，于中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院產(chǎn)科病房行腔內(nèi)引產(chǎn)的死亡胎

3、兒12例?；颊呒凹覍偻馑劳鎏菏w由醫(yī)院處理。孕28～34周，胎兒性別不限，取胎兒雙側(cè)肺組織為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。 2、主要試劑 Pereoll、15％FCS-RPMl1640、地塞米松、鹽酸氨溴索等。 3、實(shí)驗(yàn)方法收集的胎肺組織經(jīng)解剖分離和0.25％胰蛋白酶-EDTA消化后，采用密度梯度離心法對(duì)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞進(jìn)行分離和純化，在15％FCS-RPMl1640培養(yǎng)液、37℃的條件下，培養(yǎng)至細(xì)胞長成單層。倒置顯微鏡下觀察細(xì)

4、胞的生長狀態(tài)，并在透射電子顯微鏡下鑒定Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞。對(duì)培養(yǎng)成功的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分別施加．ABX、DEX和ABX+DEX，并繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)，用Bartlett法和改良Lowry法分別測(cè)定用藥后的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞中飽和磷脂和總蛋白的含量，以飽和磷脂/總蛋白比值作為數(shù)據(jù)結(jié)果。 所得到的數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理與分析，t檢驗(yàn)比較總體均數(shù)的差異，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05。