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文檔簡介
1、目的:探討“促育生精方”對環(huán)磷酰胺(CP)致少弱精癥模型大鼠精子特異性鈣通道蛋白CatSper1、CatSper2的影響,并探討其調(diào)節(jié)機(jī)制,為該方的臨床療效提供可靠的科學(xué)依據(jù)。
方法:將50只雄性、13周齡Wistar大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)6天,隨機(jī)分為模型組(MG)、空白對照組(BCG)、低劑量藥物組(LDCG)、中劑量藥物組(MDCG)、高劑量藥物組(HDCG),每組十只。 BCG腹腔注射生理鹽水;MG、LDCG、MDCG、HDC
2、G腹腔注射CP30mg/(kg·d),共5天。建立大鼠少弱精子癥模型后,LDCG、MDCG、HDCG大鼠每天3ml促育生精方免煎顆粒藥液灌胃,(低、中、高劑量對映濃度為1.73mg/ml、
3.47mg/ml、6.93mg/ml),BCG和MG用生理鹽水灌胃,持續(xù)30天。末次給藥24 h后,迅速取出動物精子標(biāo)本。光學(xué)顯微鏡檢測精子數(shù)目、精子活力,用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,采用實時熒光定量PCR法檢測CatSper1
3、mRNA、CatSper2 mRNA在各組大鼠精子中的表達(dá);用蛋白免疫印跡法檢測CatSper1蛋白,CatSper2蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:成功建立少弱精子癥大鼠模型。與BCG比較,MG的精子數(shù)目、a級、a+b級精子比率,細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度、CatSper1 mRNA、CatSper2 mRNA及其相應(yīng)蛋白表達(dá)量顯著降低(P<0.05);與MG比較,各劑量藥物治療組精子數(shù)目均增加(P<0.05),MDCG、HDCG的a級、a+b
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