Syn-HSCT治療T1DM小鼠療效及相關機制的研究.pdf

1、目的： 1、觀察syn-HSCT治療T1DM小鼠療效。 2、觀察CD4+/CD8+CD19+、NK、Th1/Th2及Treg細胞亞群在C57BL/6J小鼠發(fā)病后及Syn-HsCT治療前后的變化，探討syn-HscT治療T1DM有效的可能機制。 第一部分:T1DM小鼠動物模型的建立方法：C57BL/6J近交系小鼠馴化一周，隨機選一天禁食8小時后測血糖。藥物處理前一天稱量小鼠體重，根據(jù)體重分組，每組中小鼠體重相差不超

2、過0.5g。給藥前，小鼠需禁食(不禁水)8小時(早上8點禁食，下午4點給藥)。將稱量好的鏈脲佐菌素(STZ)溶解于檸檬酸緩沖液中，充分溶解后馬上注射入小鼠腹腔。連續(xù)注射5天。同時給正常對照鼠腹腔注射生理鹽水。最后一劑STZ后第3天(實驗第8天)時開始測血糖，用斷尾法取血(取血前早上8點禁食，下午4點測血糖，禁食8小時)，血糖儀測尾靜脈血糖，連續(xù)2天血糖值>13.9mmol/L時為造模成功。以后每周兩次用斷尾法取血監(jiān)測血糖。 第二

3、部分:Syn-HSCT治療T1DM小鼠療效及治療前后T1DM小鼠的CD4+/CD8+CD19+NK細胞比例的變化方法：T1DM小鼠隨機分為2組，病鼠對照組(6只)和移植組(6只)。同時以正常小鼠設立正常對照組(6只)。移植組于成模后第10天進行同基因造血干細胞移植(Syn-HSCT)移植，在移植后120天后處死。斷尾法觀察各組血糖變化，流式細胞儀檢測CD4+/CD8+CD19+NK細胞亞群變化情況。 第三部分: Syn-HSCT

4、治療T1DM小鼠前后脾臟Th1/Th2、Treg細胞比例的變化方法：T1DM小鼠隨機分為2組，病鼠對照組(6只)和移植組(10只)。同時以正常小鼠設立正常對照組(6只)。移植組于成模后第10天進行同基因造血干細胞移植(Syn-HSCT)移植，在移植后120天后處死。斷尾法觀察各組血糖變化，流式細胞儀檢Th1/Th2 Treg細胞亞群變化情況。 結論： 1、對C57BL/6J近交系小鼠低劑量STZ連續(xù)腹腔注射可建立TIDM

5、小鼠動物模型。 2、T1DM小鼠CD4/CD8、NK細胞、Th1/Th2、及Treg細胞比例較正常鼠明顯升高(P＜0.05)，CD19+細胞比例較正常鼠明顯降低(P<0.05)。 3、Syn-HSCT治療T1DM小鼠有效。 4、Syn-HSCT治療T1DM小鼠后，CD4/CD8、NK細胞、Th1/Th2及Treg細胞比例較未治療病鼠明顯降低(P<0.05)，CD19+細胞比例明顯升高(P<0.05)，這些變化可能