2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、白血病是血液系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,發(fā)病機(jī)制目前仍然不是很明確.隨著聯(lián)合化療,靶向治療以及造血干細(xì)胞移植等的臨床應(yīng)用,白血病的預(yù)后已經(jīng)大為改觀.但化療的毒副作用,藥品價(jià)格高,以及耐藥機(jī)制的出現(xiàn)使得治療仍然具有一定局限性.因此,尋找一種低毒高效的抗白血病藥物是白血病研究的重要內(nèi)容之一.重樓是一種應(yīng)用廣泛的中草藥,其根莖為藥用部分,生長(zhǎng)在中國(guó)南方,具有消炎抗菌,止血,鎮(zhèn)靜止痛等作用.我們新近在尋找治療慢性粒細(xì)胞白血病新藥時(shí)發(fā)現(xiàn)從重樓中提取出來的

2、小分子單體(重樓皂甙Ⅰ)在不影響正常骨髓及外周血單核細(xì)胞增殖的情況下能明顯抑制K562細(xì)胞的增殖,并且對(duì)耐格列衛(wèi)的K562-G01細(xì)胞系及其它多種白血病細(xì)胞系都有抑制作用,這說明對(duì)K562細(xì)胞的作用機(jī)制應(yīng)該與抑制bcr/abl癌性融合蛋白無關(guān),但是具體的作用機(jī)制仍不明確. 本研究應(yīng)用MTT試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR等技術(shù)和方法深入研究重樓皂甙Ⅰ抗人白血病的可能機(jī)制,現(xiàn)將初步研究結(jié)果報(bào)道如下. 材料與方法 培養(yǎng)不同的白

3、血病細(xì)胞株,用重樓皂甙I按指定時(shí)間和劑量干預(yù)細(xì)胞.應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力,求出重樓皂甙I對(duì)各細(xì)胞株及正常骨髓細(xì)胞和外周血細(xì)胞的48h IC<,50>濃度;應(yīng)用Annexin V-FLUOS/PI試劑盒和流式細(xì)胞術(shù)定量分析早期調(diào)亡細(xì)胞百分比;用cytoperm/cytofix和Caspase-3-McAb-PE定量檢測(cè)含活化半胱天冬酶.3(Caspase-3)細(xì)胞百分比;用RT-PCR檢測(cè)部分基因P53及GADD45 α的表達(dá)趨勢(shì).

4、 結(jié)果 (1)重樓皂甙I作用白血病細(xì)胞株K562-G01、K562、THPl、U937、Raji、H9、KG-1 48 h,其50﹪細(xì)胞生存受抑時(shí)的半數(shù)抑制濃度(IC<'50>)分別為1.86 μm、1.34 μm、1.18 μm、1.72 μm、1.88 μm、0.89 μm和1.38 μm,而對(duì)正常骨髓和外周血的IC<,50>分別為71.12 μm和29.2 μm. (2)K562-G01細(xì)胞經(jīng)重樓皂甙I處理后,

5、G0/G1期、S期和G2/M期細(xì)胞比例均顯著下降,并且具有時(shí)間依賴性.而亞二倍體峰(凋亡細(xì)胞峰)細(xì)胞隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)而增加. (3)5 μm的重樓皂甙I作用K562/G01細(xì)胞24h后,89.1﹪的細(xì)胞表達(dá)活化的Caspase 3凋亡分子,84.32﹪的細(xì)胞發(fā)生凋亡. (4)RT-PCR結(jié)果顯示重樓皂甙I能明顯提高白血病細(xì)胞P53及GADD45 α基因的表達(dá). 結(jié)論 (1)重樓皂甙I能通過誘導(dǎo)凋亡來抑制多

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