XPD和PPARγ對(duì)HepG2增殖及ERG表達(dá)的影響.pdf

1、 分類號(hào) ： 密級(jí) ： U D C ： 學(xué)號(hào) ：406520511110 南 昌 大 學(xué) 碩 士 研 究 生 學(xué) 位 論 文 XPD 和 PPARγ對(duì) HepG2 增殖及 ERG 表達(dá)的影響 XPD 和 PPARγ對(duì) HepG2 增殖及 ERG 表達(dá)的影響 Effects

2、 of XPD and PPARγ on Proliferation of human hepatoma G2 cell and the expression of ERG gene 何月 何月 培養(yǎng)單位（院、系） ：南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院 指導(dǎo)教師姓名、職稱：羅文教授 主任醫(yī)師 申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門(mén)類：醫(yī)學(xué) 學(xué)科專業(yè)名稱：內(nèi)科學(xué)（消化系病學(xué)） 論文答辯日期：2014 年 5 月 29 日 答辯委員會(huì)主席： 何明 評(píng)閱人： 劉敦

3、菊 陳建勇 2014 年 5 月 摘要 II 摘 要 摘 要 目的 目的: 觀察人著色性干皮病基因 D(XPD)對(duì)癌基因 ERG(Ets Related Gene)表達(dá)的影響，并探討其和過(guò)氧化物酶增殖物激活受體(PPARγ)對(duì)肝癌細(xì)胞 HepG2增殖的影響. 方法： 方法：本實(shí)驗(yàn)采用脂質(zhì)體 LipofectamineTM 2000 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法，在肝癌細(xì)胞HepG2 中分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)入空

4、載質(zhì)粒 pEGFP-N2 和重組質(zhì)粒 pEGFP-N2/XPD，轉(zhuǎn)染24 小時(shí)后， 在處理組中加入 10μmol/L 的 GW9662(PPARγ 抑制劑)， 孵育 48 小時(shí)后，實(shí)驗(yàn) 6 組分別用 RT-PCR(半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng))和 Western blotting(蛋白印跡)法依次檢測(cè) XPD 基因、 PPARγ 基因和 ERG 基因的 mRNA 和蛋白表達(dá)量的變化。 本實(shí)驗(yàn)分為 6 組： 空白對(duì)照組、 脂質(zhì)體組、 pEGF

5、P-N2 組、 pEGFP-N2/XPD組、pEGFP-N2/XPD + GW9662 組及 GW9662 組；實(shí)驗(yàn) 6 組依次用 MTT 比色法觀察肝癌細(xì)胞增殖活力；實(shí)驗(yàn) 6 組按次序用流式細(xì)胞儀檢測(cè)肝癌細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果： 結(jié)果：RT-PCR 和 Western blotting 檢測(cè)提示：重組質(zhì)粒 pEGFP-N2/XPD 的轉(zhuǎn)染使得 XPD 的 mRNA 和蛋白發(fā)生過(guò)表達(dá)（0.2075±0.0053，3.8042

6、77;1.0889，P均 <0.001） ；XPD 表達(dá)增高使得 ERG 基因表達(dá)明顯降低（0.0091±0.0006，0.0518±0.0003，P 均 <0.001） ，同時(shí)使得 PPARγ 表達(dá)增高（0.6294±0.0218，0.0283±0.0009，P 均 <0.001） ， 而 GW9662 能抑制 XPD 這一作用。MTT 結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染了 XPD 的肝癌細(xì)胞 H

7、epG2，其細(xì)胞增殖活力顯著降低，GW9662 能明顯削弱 XPD 這個(gè)作用（0.5839±0.0804，P 均<0.001） 。流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示：與 pEGFP-N2/XPD 組比較，轉(zhuǎn)染了 XPD 的實(shí)驗(yàn)組中 HepG2 細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯增加，而 GW9662 能抑制 XPD 這一作用（15.3217±0.8089，P 均 <0.001） 。 結(jié)論： 結(jié)論：1、人著色性干皮病基因 D 能抑制 ERG